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文檔簡介
1、目的:采用Taqman 探針技術(shù),建立熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(FQ-RT-PCR)檢測幼紅巨噬細胞黏附蛋白(EMP)mRNA的方法并對方法學進行評價。
方法:用primer2.0 軟件設(shè)計EMP 引物和Taqman 探針,優(yōu)化反應體系,建立EMP mRNA的FQ-RT-PCR方法。用pGEM-Teasy 載體與普通PCR擴增所得的EMP cDNA片段進行連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒作為標準品,并進行方法學評價。
結(jié)
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