清熱化瘀Ⅱ號(hào)方對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷TLR3及TRAM mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察清熱化瘀Ⅱ號(hào)方對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷Toll樣受體3(TLR3)、TRIF相關(guān)受體銜接分子(TRAM)的影響,探討清熱化瘀Ⅱ號(hào)方對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷神經(jīng)元保護(hù)的作用機(jī)制。
　　方法:將成年健康SD大鼠192只,按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為兩大組。每組96只隨機(jī)分為4個(gè)亞組:空白組(A組)、假手術(shù)組(B組)、腦缺血再灌注組(C組)、清熱化瘀Ⅱ號(hào)方組(D組)。采用二次線栓法制備大鼠局灶性腦缺血再灌注模型。各組分別作以下處理:A組自

2、由飲食;正常飼養(yǎng);B組線栓只插入頸內(nèi)動(dòng)脈9mm,術(shù)后正常飼養(yǎng),予生理鹽水灌胃;C組線栓插入頸內(nèi)動(dòng)脈18-20mm,術(shù)后正常飼養(yǎng),予生理鹽水灌胃;D組術(shù)后清熱化瘀Ⅱ號(hào)方灌胃,余處理同C組。參考Longa的5分制法對(duì)大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分,B組、C組和D組大鼠分別在術(shù)后I/R2h后3h、6h、12h、24h、48h進(jìn)行標(biāo)本采集。取材后,常規(guī)HE染色并在光鏡下觀察各組腦組織病理形態(tài)學(xué)改變,應(yīng)用熒光定量PCR法檢測(cè)缺血側(cè)海馬區(qū)TLR3、TRA

3、M的mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:1. HE染色結(jié)果:光鏡下A組及B組均未見神經(jīng)元損傷, C組及D組有不同程度的神經(jīng)元損傷,D組在各時(shí)間點(diǎn)的受損神經(jīng)元明顯少于C組;2.熒光定量PCR結(jié)果:(1)A組與B組TLR3 mRNA呈現(xiàn)低水平表達(dá);C組TLR3 mRNA表達(dá)較B組明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P<0.05);C組和D組中,在缺血再灌注3h,TLR3 mRNA表達(dá)開始增加,至24h表達(dá)達(dá)峰,48h后表達(dá)逐步下降。D組TLR3 m

4、RNA表達(dá)活性在同一時(shí)間點(diǎn)相比均低于 C組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);(2)A組與B組TRAM mRNA呈現(xiàn)低水平表達(dá);C組TRAM mRNA表達(dá)較 B組明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P<0.05);C組和D組中,在缺血再灌注3h,TRAM mRNA表達(dá)開始增加,至24h表達(dá)達(dá)峰,48h后表達(dá)逐步下降。D組TRAM mRNA表達(dá)活性在同一時(shí)間點(diǎn)相比均低于C組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P<0.05)。
　　結(jié)論:清熱化瘀Ⅱ號(hào)方可