大白菜花藥培養(yǎng)體系的構建.pdf

1、以15個大白菜品種為試材，采用花藥培養(yǎng)方法，對花藥胚狀體誘導的影響因素、提高花培植株獲得率的方法、花培植株繼代培養(yǎng)、生根移栽技術以及花培植株的倍性鑒定方法進行了研究，旨在建立大白菜花藥培養(yǎng)技術體系。研究結果如下： 1.不同基因型的大白菜品種花藥培養(yǎng)小孢子胚胎發(fā)生能力有很大差異。在供試的15大白菜品種中，12個品種獲得了胚狀體。 2.花蕾形態(tài)特征與小孢子發(fā)育時期有關。細胞學觀察表明，當花蕾長為2.0～3.0mm，花瓣與花藥

2、長度之比1/2～4/5時，50～70％的小孢子發(fā)育處于單核晚期，適合進行花藥培養(yǎng)。 3.基本培養(yǎng)基和蔗糖濃度對小孢子胚胎發(fā)生和發(fā)育有一定影響。改良B5培養(yǎng)基對胚狀體誘導效果較好。改良B5培養(yǎng)基和B5培養(yǎng)基適宜的蔗糖濃度為10％；MS培養(yǎng)基適宜的蔗糖濃度為12％。 4.有機成分加倍后的培養(yǎng)基對胚狀體的誘導效果普遍優(yōu)于原基本培養(yǎng)基。 5.培養(yǎng)基中添加10mg/L的AgNO3能促進胚狀體的產生，但過量的AgNO3會抑制

3、胚狀體的發(fā)生。 6.變溫處理對花藥胚狀體的發(fā)生有促進作用。在本試驗設計的變溫處理條件中，高溫處理48h胚狀體的誘導率最高，低溫處理24h對胚狀體的誘導效果最好。不同高溫處理所對應的最適低溫處理時間不同，高溫處理24h和高溫處理72h的最適低溫處理時間為48h，高溫處理48h的最適低溫處理時間為24h。 7.在一定范圍內，胚狀體成苗率隨培養(yǎng)基水分含量的增加而降低。瓊脂含量為1.2％的培養(yǎng)基既能滿足胚狀體萌發(fā)所需要的干燥環(huán)境

4、，又能保證胚萌發(fā)所需水分，是較適合成苗的培養(yǎng)基。 8.“MS+3％蔗糖+0.8％瓊脂”是大白菜花培植株繼代和復壯培養(yǎng)最適宜的培養(yǎng)基?！?/2MS+NAA0.1mg/L+3％蔗糖+0.8％瓊脂”和“MS+NAA0.1mg/L+3％蔗糖+0.8％瓊脂”是較適宜的生根培養(yǎng)基。 9.不同基因型材料的花培植株群體中單倍體、二倍體、高倍體所占比例不同，品種和品系間花培植株自然加倍率有顯著差異。 10.根尖染色體計數(shù)、染色中心