大白菜花藥培養(yǎng)技術(shù)體系的研究.pdf

1、以大白菜的9種基因型為材料，進(jìn)行花藥培養(yǎng)。研究大白菜基因型對花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)的影響;以F<,1>D-1和F<,1>D-3為材料，研究不同生長季節(jié)、花藥發(fā)育時(shí)期、培養(yǎng)條件、預(yù)處理以及培養(yǎng)基附加物AgNO<,3>對大白菜花藥培養(yǎng)的影響；同時(shí)對大白菜花藥培養(yǎng)獲得的再生植株進(jìn)行了細(xì)胞學(xué)觀察，并研究了植株移栽的方法。 結(jié)果表明： (1)大白菜不同基因型的花藥在培養(yǎng)能力上有差異。供試的9份材料中有兩份材料沒有愈傷組織產(chǎn)生;有兩份材料有胚

2、狀體產(chǎn)生；其它材料產(chǎn)生的都是愈傷組織。 (2)供體植株的生長環(huán)境對花藥胚狀體誘導(dǎo)和分化有一定的影響，春季取材的花藥容易誘導(dǎo)形成胚狀體。花粉的發(fā)育時(shí)期是影響花藥培養(yǎng)效果的重要因素。就大白菜而言，選取花粉發(fā)育時(shí)期為單核-雙核早期的花藥進(jìn)行培養(yǎng)，能獲得較高的胚狀體誘導(dǎo)率和分化率，而此時(shí)花蕾的外部特征是：花蕾縱徑長2～3mm，花藥呈淡黃綠色半透明。在進(jìn)行花藥培養(yǎng)時(shí)胚狀體誘導(dǎo)階段一般以暗培養(yǎng)為好，有利于胚狀體的形成，而強(qiáng)光有利于以后的綠苗

3、分化。在花藥培養(yǎng)前對花蕾進(jìn)行4℃3d的低溫預(yù)處理，并且培養(yǎng)初期給予花藥33℃1d的高溫暗培養(yǎng)，可以獲得較好的誘導(dǎo)效果。8％蔗糖濃度處理的誘導(dǎo)效果最好，高濃度的蔗糖有利于花粉小孢子的萌發(fā)，提高誘導(dǎo)率。培養(yǎng)基中補(bǔ)加10mg/L的AgNO<,3>可以有效的促進(jìn)花藥胚狀體誘導(dǎo)率。 (3)胚狀體轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基3天后開始轉(zhuǎn)綠，15天后形成再生植株；愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基先形成大量根，30天后有少量再生植株形成。 (4)通過花藥培