靜脈注射骨髓基質(zhì)細(xì)胞增加腦梗死大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá).pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文靜脈注射骨髓基質(zhì)細(xì)胞增加腦梗死大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)姓名：石艷玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：何志義20050501靜脈注射骨髓基質(zhì)細(xì)胞增加腦梗死大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)目 的骨髓基質(zhì)細(xì)胞( M S C s ) 是具有多向分化潛能的非造血干細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞注射入腦內(nèi)，可遷移至缺血組織，并分化成為神經(jīng)元樣細(xì)胞與膠質(zhì)細(xì)胞，同時(shí)分泌多種細(xì)胞因子，而這些細(xì)胞因子在腦損傷修復(fù)過程中將起到重要的作

2、用。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子( V E G F ) 作為血管內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原，既參與血管的發(fā)生又參與血管的新生，研究報(bào)道大鼠腦缺血后缺血腦組織中V E G F 表達(dá)增加，并影響腦梗死患者的預(yù)后。本試驗(yàn)的目的是將骨髓基質(zhì)細(xì)胞靜脈注射給大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞再灌注模型，然后觀察注射的細(xì)胞在腦內(nèi)的分布以及腦內(nèi)V E G F 的表達(dá)，以探討骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療腦梗死的機(jī)制。方 法采用L o n g a 線栓法建立4 5 只大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞再灌注模型：用矗徑

3、0 ．2 6 m m 的尼龍線阻塞大腦中動(dòng)脈，2 小時(shí)后拔除尼龍線以實(shí)現(xiàn)大腦中動(dòng)脈閉塞再灌注。動(dòng)物模型隨機(jī)分成M S C s 治療組、鹽水對(duì)照組、空白對(duì)照組，每組又分3 天、7 天、1 4 天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)。為證明腦梗死病灶的形成，大腦中動(dòng)脈閉塞再灌注后，摘除腦組織，立即用T I C 染色，活組織被染為紅色，梗死組織不著色。參考F r i e d e n s t e i n 的方法，從2 月齡W i s t a r 大鼠后肢骨髓分離、獲取骨

4、髓基質(zhì)細(xì)胞，過濾、離心后，細(xì)胞用2 0 ％D M E M ( D u l b e c c om o d i f i e dE a 出m e d i u m ，D M E M ，同時(shí)含有2 0 ％胎牛血清+ 青霉素1 0 0 “／m l + 鏈酶素l o o p ∥m 1 ) 、種植密度2 ×1 0 5 個(gè)細(xì)胞／c m 2 接種于2 5 c m 2 塑料培養(yǎng)瓶中，在3 7 ' t 2 、5 ％C O z 、飽和濕度的培養(yǎng)