新型登革熱傳播媒介監(jiān)測誘蚊誘卵器開發(fā)應(yīng)用研究.pdf

1、登革熱是由蚊蟲傳播登革熱病毒引起的急性傳染病，隨著城市化和全球一體化的快速發(fā)展、過分依賴殺蟲劑導(dǎo)致抗藥性等問題20世紀(jì)80年代以來流行越來越嚴(yán)重，全球每年有百多萬病例，近25億人口受到登革熱的威脅。我國自1978年廣東省再次爆發(fā)本病流行后，有不斷蔓延并向北移動擴(kuò)散的趨勢。由于登革熱仍沒有特異性疫苗和治療藥物，所以加強(qiáng)登革熱及媒介監(jiān)測和控制仍是當(dāng)前最有效的預(yù)防措施，WHO特別強(qiáng)調(diào)加強(qiáng)新型敏感的媒介監(jiān)測方法的研究。本課題來源于廣東省疾病預(yù)防

2、控制中心的廣東省應(yīng)急病原檢測重點實驗室啟動研究項目，屬廣東省重點科技項目(2003B60127)。 本研究目的是根據(jù)登革熱必須通過蚊蟲的叮咬傳播和蚊蟲吸血后產(chǎn)卵的特點，研究開發(fā)對伊蚊特異性高的誘蚊誘卵器(Mosquitoandovipositiontrap，Mosq-ovitrap)，建立科學(xué)高效、簡便可行的監(jiān)測方法，既監(jiān)測社區(qū)環(huán)境伊蚊密度，又采集社區(qū)環(huán)境中吸血后最可能帶毒的蚊蟲，利用PCR和細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)對蚊蟲進(jìn)行登革熱病毒的

3、帶毒監(jiān)測，建立簡易、科學(xué)、可行的登革熱媒介的監(jiān)測體系，再結(jié)合登革熱疾病監(jiān)測，為建立登革熱可能流行的分級預(yù)警體系奠定基礎(chǔ)。 1.誘蚊誘卵器(Mosq-ovitrap)的設(shè)計開發(fā)研究：根據(jù)白紋伊蚊喜歡趨向黑色、在陰涼潮濕的場所棲息活動，吸血后需尋找容器清水型積水，并在潮濕粗糙表面上產(chǎn)卵的生態(tài)特點，參考美國開發(fā)的誘卵杯，結(jié)合誘蠅籠的捕蠅原理，有針對性設(shè)計誘蚊誘卵器。 誘蚊誘卵器(Mosq-ovitrap)是指具有引誘伊蚊進(jìn)入產(chǎn)

4、卵并阻止其逃逸而捕獲蚊蟲的器械。它由瓶體和瓶蓋組成。瓶體為圓柱型透明塑料瓶，直徑為70mm,高為100mm，瓶底向上突出一個橢圓圓錐型，其高為20mm，用于放置白色濾紙供伊蚊產(chǎn)卵，濾紙通過橢圓型下部凹槽的水保持濕潤。瓶蓋為圓型黑色塑料，直徑為75mm，高為23mm，瓶蓋剛好與瓶身擰緊；瓶蓋上開有三個向內(nèi)突出的倒圓錐管，上口徑為12mm，孔下口徑為7mm，管長21mm。2004年已獲國家專利，專利號：ZL03273724.6。 2

5、.實驗室誘蚊誘卵研究：將50只吸血后2天的白紋伊蚊雌蚊放入試驗玻璃房(1.8×1.8×1.8m3)，在玻璃房內(nèi)兩個角落各平行配對布放誘蚊誘卵器及美國CDC誘卵杯、實驗室產(chǎn)卵杯、陶瓷容器和竹筒。連續(xù)布放4天，到第4天觀察計算誘到的蚊蟲數(shù)，并將蚊蟲捕捉后將蟲卵數(shù)倒進(jìn)白搪瓷盆，在放大鏡下觀察計算蚊卵數(shù)。試驗重復(fù)4次，并依次輪換布放位置。新型誘蚊誘卵器的誘蚊誘卵指數(shù)(Mosquitoandovipositionpositiveindex，MOI

6、)和誘卵指數(shù)(Ovipositionindex，OI)為100，誘蚊誘卵器不但能誘卵，而且能捕獲產(chǎn)卵的成蚊，50只成蚊有近半數(shù)進(jìn)入誘蚊誘卵器內(nèi)，誘蚊密度指數(shù)(Mosquito-trapdensityindex,MDI)為12.25，蚊卵密度指數(shù)(Eggdensityindex，EDI)為1369.2個。 3.誘蚊誘卵器布放時間研究：于2004年9～11月選在廣州市某學(xué)校園區(qū)居民區(qū)、校園活動場所綠化帶和花圃做為研究現(xiàn)場，按每25～

7、50m布放一個誘蚊誘卵器，每月上旬各布放70個，連續(xù)布放三個月。誘蚊誘卵器均布放在光線良好的花草樹陰下地面或陽臺；放后第2、3、4、7天觀察誘卵器捕獲蚊蟲(死、活)數(shù)，產(chǎn)卵陽性數(shù)，記錄后放回原位置，第7天觀察后收集回實驗室。 誘蚊誘卵器布放后第2、3、4、7天的誘蚊誘卵指數(shù)分別為23.4、38.5、50.3和72.8，隨著布放時間延長誘蚊誘卵指數(shù)逐漸增高，但速率逐漸減慢。捕蚊總數(shù)、誘蚊密度指數(shù)和捕獲活蚊數(shù)也隨布放時間延長而增加，

8、但活蚊比率卻逐漸減少，分別是83.3％、68.2％、58.0％和35.9％。 4.誘蚊誘卵器布放高度的研究：選在佛山市區(qū)一花木場做為研究現(xiàn)場，按每25～50m距離選擇有樹木或可在垂直方向的地面、離地面1m和1.5m高度的場所各布放一個誘蚊誘卵器，并均布放在花草樹陰下；隨后第4天觀察記錄誘卵器捕獲蚊蟲數(shù)，產(chǎn)卵陽性數(shù)。 誘蚊誘卵器布放在地面和同一垂直高度1m或1.5m時，誘蚊誘卵指數(shù)分別為19.30，9.26和4.63，地面

9、的誘蚊誘卵指數(shù)高于1m和1.5m高度的指數(shù)。 5.誘蚊誘卵器與誘蚊杯現(xiàn)場監(jiān)測效果的比較研究：從2004年8～11月和2005年2～8月，選擇在廣州的一個校園進(jìn)行研究，將準(zhǔn)備好的誘蚊誘卵器和誘卵杯布放在陰涼隱蔽的場所，擺放距離在1m左右，每月交替位置。在擺放第四天，檢查是否捕獲蚊蟲或(和)產(chǎn)卵，并記錄捕獲的蚊蟲數(shù)及種類，再將其放回原來位置；第7天時再檢查誘蚊和誘卵的結(jié)果。 誘蚊誘卵器和誘卵杯布放4天時，陽性指數(shù)分別是35.

10、5和56.7，布放7天時陽性指數(shù)分別是53.3和71.5，誘卵杯布放7天時誘卵指數(shù)是布放4天時誘蚊誘卵指數(shù)的2倍。誘蚊誘卵器可以誘集成蚊，布放4天，回收662個誘蚊誘卵器，誘伊蚊密度指數(shù)為1.21±1.12，每個誘捕蚊蟲為0～8只；布放4天共誘集284只白紋伊蚊，另外還有2只致乏庫蚊，白紋伊蚊占99.3％。 每月監(jiān)測結(jié)果顯示，布放4天的誘蚊誘卵指數(shù)與誘卵杯布放4天和7天的誘卵指數(shù)都存在正相關(guān)關(guān)系，r=0.845，P=0.001，

11、y=17.296+1.115x和r=0.838，P=0.001，y=25.548+1.312x。 應(yīng)用誘蚊誘卵器布放4天，誘蚊誘卵指數(shù)具有明顯的季節(jié)性變化。但應(yīng)用誘卵杯布放7天，誘卵陽性指數(shù)從4月份至11月份都維持在很高的水平，季節(jié)變化不明顯。 6.誘蚊誘卵器與傳統(tǒng)幼蟲指數(shù)監(jiān)測效果的比較研究：從2004年3月至2005年11月，選擇在廣東省佛山市和揭陽市進(jìn)行研究，在選定的試驗現(xiàn)場，隨機(jī)從每5戶家庭中選擇1戶布放一個誘蚊誘

12、卵器，或在醫(yī)院、學(xué)校、機(jī)關(guān)事業(yè)單位和公園花圃的環(huán)境時，按每25-50m距離布放一個誘蚊誘卵器。在擺放誘蚊誘卵器后的第四天，用肉眼或10倍放大鏡檢查誘蚊誘卵器是否捕獲蚊蟲及(或)產(chǎn)卵，并記錄和收集捕獲的蚊蟲數(shù)及種類。同時調(diào)查室內(nèi)及室外周圍的積水容器和蚊蟲孳生容器數(shù)，或以誘蚊誘卵器為中心，調(diào)查半徑5m以內(nèi)周圍環(huán)境(按1戶單位計算)的容器積水?dāng)?shù)和蚊蟲孳生容器數(shù)。 7.誘蚊誘卵器在登革熱暴發(fā)流行時媒介監(jiān)測應(yīng)用研究：2004年9月中山市爆

13、發(fā)登革熱流行時，按登革熱診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查搜索病例，應(yīng)用誘蚊誘卵器在疫區(qū)布放監(jiān)測蚊蟲密度并誘集成蚊，同時調(diào)查疫點的布雷圖指數(shù)，應(yīng)用TaqManMGBReal-timePCR檢測誘集到的白紋伊蚊體內(nèi)登革病毒。 2004年9月24日確認(rèn)ZZ社區(qū)登革熱暴發(fā)流行后，發(fā)現(xiàn)布雷圖指數(shù)為65.2，通過啟動應(yīng)急滅蚊等登革熱綜合控制措施，成蚊密度即誘蚊誘卵指數(shù)控制在4.5～10.3，布雷圖指數(shù)控制在4.7～6.1，本次流行在應(yīng)急控制后第

14、21天結(jié)束，共34例病人。 對疫區(qū)社區(qū)捕獲的18只和非疫區(qū)社區(qū)捕獲的87只白紋伊蚊成蚊，分組研磨，提取RNA后進(jìn)行二步法TaqManMGBReal-timePCR，均未發(fā)現(xiàn)登革熱病毒RNA，而人工感染登革病毒的2只蚊蟲則檢測陽性。 結(jié)論： 誘蚊誘卵器(Mosq-Ovitrap)是指具有引誘伊蚊進(jìn)入產(chǎn)卵并阻止其逃逸而捕獲蚊蟲的器械。現(xiàn)場應(yīng)用誘蚊誘卵器監(jiān)測白紋伊蚊，布放最佳位置是在是社區(qū)環(huán)境的樹蔭、花盆、綠化帶花草木

15、下的地面上，每25～50m布放1個，布放時間4天。 誘蚊誘卵法直接通過誘蚊誘卵指數(shù)、誘蚊密度指數(shù)，定量分析監(jiān)測區(qū)域蚊蟲密度，敏感地反映實際成蚊密度的變化和季節(jié)消長，而且可直觀鑒別捕獲的蚊蟲種類，具有快速、直觀、可定量分析的特點，同時可以捕獲蚊蟲進(jìn)行病毒檢測。誘蚊誘卵指數(shù)與目前國際通用的誘卵杯誘卵指數(shù)存在正相關(guān)關(guān)系，與傳統(tǒng)布雷圖指數(shù)和房屋指數(shù)也存在正相關(guān)關(guān)系，特別是與布雷圖指數(shù)結(jié)果相接近。 當(dāng)?shù)歉餆岜┌l(fā)流行時，誘蚊誘卵法可