人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（ECV304）表達(dá)的HLA-G1對同種反應(yīng)性PBMC分泌Th1-Th2型細(xì)胞因子的影響.pdf

1、有研究證實在51例接受心臟移植術(shù)患者中,有9例移植心臟組織表達(dá)HLA-G,其急性排斥反應(yīng)和慢性排斥反應(yīng)發(fā)作明顯輕于沒有HLA-G表達(dá)者,提示HLA-G可能參與誘導(dǎo)同種移植耐受,而HLA-G誘導(dǎo)同種移植耐受的機(jī)制仍在探索中.目的與方法:為探討HLA-G是否能影響Th1/Th2型細(xì)胞因子的分泌,該研究采用脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染技術(shù),將已構(gòu)建好的真核表達(dá)質(zhì)粒HLA-G1-pcDNA3.0轉(zhuǎn)染至人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系(ECV304)中,用G418篩選,

2、建立穩(wěn)定表達(dá)HLA-G1的細(xì)胞系ECV304-G1(用間接免疫熒光法和流式細(xì)胞術(shù)分析鑒定),以轉(zhuǎn)染pcDNA3.0空質(zhì)粒的ECV304和轉(zhuǎn)染HLA-G1-pcDNA3.0并表達(dá)HLA-G1的ECV304-G1細(xì)胞分別作為刺激細(xì)胞,滅活后,與健康人PBMCs共同培養(yǎng),用ELISA檢測上清液中Th1/Th2型細(xì)胞因子(以IL-2、IFN-γ代表Th1型細(xì)胞因子,IL-4、IL-10代表Th2型細(xì)胞因子)的濃度,觀察HLA-G1對同種異體抗原

3、激活的PBMCs分泌Th1/Th2型細(xì)胞因子的影響.結(jié)論:HLA-G1能引起由同種異體抗原激活的PBMC分泌IL-10增加,提示HLA-G1有可能使Th1/Th2型細(xì)胞因子向Th2型偏移.而HLA-G1對IL-2,IFN-γ、IL-4分泌無明顯影響.說明HLA-G1分子誘導(dǎo)免疫耐受的機(jī)制除作為免疫細(xì)胞KIR的配體、誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡之外,誘導(dǎo)產(chǎn)生Th2型細(xì)胞因子也是HLA-G1誘導(dǎo)免疫耐受的重要機(jī)制.提示HLA-G1在誘導(dǎo)同種移植耐受、防