保護(hù)地瓜類枯萎病災(zāi)變機(jī)理及防治研究.pdf

1、本文對于甜瓜枯萎病隨著栽培年限加重的原因進(jìn)行研究，以期找到病害加重的原因，從而為生產(chǎn)上更好的防治提供依據(jù)。 對于保護(hù)地甜瓜枯萎病的發(fā)病機(jī)理的研究，主要包括以下幾個部分： 瓜類枯萎病及其防治的研究現(xiàn)狀。這部分內(nèi)容主要是總結(jié)了目前國內(nèi)外的關(guān)于瓜類枯萎病的研究和報(bào)道，以及目前生產(chǎn)上采用的防治方法。 瓜類不同栽培年限保護(hù)地土壤鐮孢菌(Fusariumspp)的種群變化、及其與其它微生物種群間的相互關(guān)系。這部分內(nèi)容包括在試

2、驗(yàn)室條件下，通過用各種培養(yǎng)基對土壤中的微生物的培養(yǎng)，進(jìn)而觀察各栽培年限的土壤中微生物在數(shù)量及種群上的變化。 多菌靈和福美雙對枯萎病鐮刀菌的毒力研究。在試驗(yàn)室中，把枯萎病鐮刀菌的菌絲接種到含有不同濃度的多菌靈和福美雙混配的培養(yǎng)基中，采用菌絲生長速率法，對菌株的抗性水平進(jìn)行測定。從而對菌株進(jìn)行評估。 甜瓜枯萎病菌的致病力的初步研究。經(jīng)過單孢純化的菌株，能過在相應(yīng)適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，再經(jīng)液體培養(yǎng)，獲得孢子，用蘸胚根法接菌，經(jīng)過

3、對獲得的菌株進(jìn)行甜瓜活體回接測定其對植株的致病能力。 分子水平上(RAPD)分析甜瓜枯萎鐮刀菌致病性的差異。 將試驗(yàn)菌株用液態(tài)氮研磨法獲得其DNA，0.8％瓊脂糖凝膠上進(jìn)行電泳檢測，檢測其質(zhì)量及純度，達(dá)到要求后，將其稀釋到20ng/μL作為PCR擴(kuò)增模板。然后通過采用UPGMA(UnweighedPairGroupMethodArithmeticAverage)進(jìn)行聚類分析，構(gòu)建樹狀圖(dendrogram)。從而分析病

4、原菌的分子水平上的差異性。 試驗(yàn)結(jié)果表明： 不同栽培年限菌株間對多菌靈的敏感性存在差異。其中連作4年的HC49菌株對多菌靈的敏感程度最低，以無栽培甜瓜歷史的HCck2菌株和栽培1年的HC12菌株對多菌靈的敏感程度最高。隨栽培年限的增加，從其中獲得的菌株對多菌靈的毒力下降。 不同菌株間對多菌靈的敏感性存在差異。測定的12株尖孢鐮刀菌中，隨著栽培年限的增加，福美雙的毒力下降，EC50值增大。 不同連作甜瓜年份

5、間的枯萎病菌回接甜瓜發(fā)病率在5％水平上具有顯著差異，同一年份中的枯萎病菌的致病力間差異不顯著。隨著甜瓜連茬時間的延長，其枯萎病菌的致病能力呈現(xiàn)明顯的增長態(tài)勢，其中連茬4年的枯萎病菌的發(fā)病率達(dá)到了85％以上。 本實(shí)驗(yàn)利用30條RAPD引物對16個鐮刀菌菌株進(jìn)行了遺傳多樣性分析，其中6條引物的擴(kuò)增產(chǎn)物具有多態(tài)性，帶型穩(wěn)定，重復(fù)性好，24條引物在某些菌株中無擴(kuò)增產(chǎn)物或擴(kuò)增質(zhì)量較差無良好穩(wěn)定性，不能進(jìn)行正常統(tǒng)計(jì)。6條RAPD引物在16個