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文檔簡介
1、目的:觀察泛素—蛋白酶體通路相關(guān)蛋白泛素、UCH-L1在大鼠實驗性視網(wǎng)膜脫離(retinal detachment,RD)后視網(wǎng)膜內(nèi)情況,探討泛素—蛋白酶體通路在是否參與調(diào)控視網(wǎng)膜脫離后細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
方法: Wistar大鼠84只(84只眼),分成空白對照組、網(wǎng)脫組及泛素—蛋白酶體通路抑制劑組,每組28只(28只眼),實驗組和抑制劑組通過在視網(wǎng)膜下注射透明質(zhì)酸鈉建立視網(wǎng)膜脫離模型,造模后抑制劑組按照0.10mg?kg-
2、1 每日腹腔注射蛋白酶體抑制劑MG132的DMSO溶液一次。在視網(wǎng)膜脫離后4d分別摘除左眼眼球,脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡;采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法,檢測泛素(ubiquitin)、泛素羥基末端水解酶L1(UCH-L1)mRNA表達(dá)水平;應(yīng)用免疫印跡法,檢測ubiquitin、UCH-L1的蛋白表達(dá)水平。采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
結(jié)
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