一種適于細(xì)胞培養(yǎng)的新材料的制備.pdf

1、多肽自組裝形成的小分子水凝膠由于具有良好的生物相容性、可降解，在組織工程、細(xì)胞培養(yǎng)、藥物控釋以及生物礦化等方面得到了廣泛應(yīng)用。目前，誘導(dǎo)多肽自組裝的方法主要包括pH改變、溫度變化、酶催化、光照等，但能真正運(yùn)用到生物體內(nèi)的體系并不多。因此，發(fā)展新的生物相容性更好的方法是研究小分子多肽自組裝面臨的挑戰(zhàn)之一。
　　 本論文第二章旨在探索利用化學(xué)還原的新途徑誘導(dǎo)多肽自組裝的可行性。首先以胱胺二鹽酸鹽、1，4-丁二酸酐等為原料化學(xué)合成了含

2、二硫鍵的連接體化合物(Fmoc-CS-OH)，然后采用固相合成法在其羧基端連接親水性短肽(EERGD)，在其氨基端連接強(qiáng)力成膠因子序列(Nap-GFFYE)合成了目標(biāo)多肽1。研究了目標(biāo)多肽1在不同的還原劑作用下在PBS緩沖液和DMEM培養(yǎng)基中的成膠性能。運(yùn)用流變手段研究了凝膠的力學(xué)性能，采用TEM表征了凝膠的形貌，并用熒光光譜研究了目標(biāo)多肽1分子間的微觀排列情況。另外還研究了加入還原劑后目標(biāo)多肽1的轉(zhuǎn)化情況以及膠體可觸變性測試。研究發(fā)現(xiàn)

3、，合成的目標(biāo)多肽1能在谷胱甘肽等多種還原劑的作用下形成成膠因子，進(jìn)而在多種緩沖液中發(fā)生自組裝形成小分子水凝膠。該水凝膠為可觸變性膠且具有三維纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，在細(xì)胞培養(yǎng)、藥物控釋等方面具有較好的應(yīng)用前景。但不足之處在于成膠因子會逐漸二聚化形成二聚體。
　　 本論文第三章旨在阻止成膠因子的二聚化，使化學(xué)還原法誘導(dǎo)多肽自組裝形成的水凝膠更加穩(wěn)定。首先合成了新的既含二硫鍵又含碳酸酯鍵的連接體化合物，然后采用固相合成法在其羧基端連接親水性短

4、肽(GGG)，在其氨基端連接成膠因子序列(Nap-GFFFG)合成目標(biāo)多肽2。用類似的方法還合成了對照多肽3以研究兩者在還原劑作用下的轉(zhuǎn)化差異。同時，研究了兩種多肽在水中的成膠性能，并對得到的膠體進(jìn)行了流變、TEM及熒光測試表征。研究發(fā)現(xiàn)，目標(biāo)多肽2在1 eq還原劑TCEP作用下形成的帶巰基的成膠因子一周后70％以上能夠轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的帶羥基的成膠因子，且還原劑使用量越大，形成的穩(wěn)定的成膠因子越多；而對照多肽3在還原劑作用下形成的成膠因子一