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1、第一部分:成年豚鼠單個心室肌細胞在常氧急性低氧及氧反常等狀態(tài)下L-Ca電流的變化及意義;目的:急性缺氧后復氧常導致細胞內(nèi)鈣超載損傷發(fā)生,該實驗旨在通過研究豚鼠心室肌細胞膜上L-Ca離子通道電流在常氧、急性低氧及氧反常等不同狀態(tài)下的改變,以期闡明導致細胞內(nèi)鈣超載的與L-Ca離子通道相關(guān)的機制.方法:用急性酶解分離法得出狀態(tài)良好的單個豚鼠心室肌細胞.采用全細胞膜片鉗技術(shù),分別記錄常氧、急性低氧及氧反常組L-Ca通道電流,并運用Pulsefi
2、t軟件對電流進行分析.結(jié)論:可見急性缺氧及氧反常都能顯著增強L-Ca通道電流幅值,對誘發(fā)細胞內(nèi)鈣超載起重要作用.第二部分:丹參(粉針劑)對成年豚鼠單個心室肌細胞在急性缺氧及氧反常等狀態(tài)下L-Ca電流的影響及意義;目的:在第一部分實驗的基礎上,運用不同濃度的丹參NaCl溶液,作用在常氧、低氧、及氧反常組豚鼠心室肌細胞上,以研究L-Ca通道電流的相對變化,期待闡釋丹參減輕及阻止細胞內(nèi)鈣超載的機理.方法:選取狀態(tài)良好的細胞,常氧狀態(tài)下鉗制并記
3、錄正常L-Ca電流后換用100﹪N<,2>飽和的臺式液灌流,缺氧10分鐘后立即恢復常氧灌流,復氧五分鐘后記錄L-Ca電流的數(shù)據(jù).開始換用不同濃度的丹參溶液作用于細胞,濃度依次從低到高,每種濃度丹參作用后第3分鐘時開始記錄L-Ca電流數(shù)據(jù),得出常氧、缺氧和缺氧后復氧丹參組數(shù)據(jù).結(jié)論:可見常氧、低氧、氧反常狀態(tài)下丹參溶液對I Ca-L的抑制呈濃度依賴性,且低濃度的丹參液對缺氧和氧反常細胞的作用更大于常氧細胞,結(jié)果提示我們:丹參溶液能有效降低
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