三種茶藨屬植物離體快繁技術(shù)研究.pdf

1、本文以楔葉茶藨、長(zhǎng)白茶藨和‘寒豐’品種為試材，對(duì)離體快繁過(guò)程中的初代培養(yǎng)、芽的增殖、愈傷組織誘導(dǎo)及再生、生根四個(gè)階段的相關(guān)問(wèn)題進(jìn)行了詳細(xì)研究。本試驗(yàn)首次成功地建立了楔葉茶藨、長(zhǎng)白茶藨和‘寒豐’品種組培無(wú)性系，為今后進(jìn)一步開展生物技術(shù)研究奠定了基礎(chǔ)。主要得出以下幾方面結(jié)論： 1將茶藨屬植物解除休眠但未萌發(fā)的枝條在室內(nèi)水培，以嫩梢頂部或帶有腋芽的莖段為外植體，采用適當(dāng)?shù)姆椒梢杂行У倪M(jìn)行外植體消毒和污染控制。用含有0.1﹪的HgCl

2、2和2滴吐溫的溶液浸泡8min，污染率可控制在55﹪以下；或者用硫酸慶大霉素100mg/L水溶液浸泡楔葉茶藨莖段30min后用0.1﹪升汞水溶液消毒8min，污染率可控制在10﹪以下，成活率達(dá)80﹪。初代培養(yǎng)采用的基本培養(yǎng)基為MS+BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L。 2適宜三種屬茶藨植物組培苗的增殖培養(yǎng)條件分別為：楔葉茶藨為MS+BA1.0mg/L+IBA0.05-0.2mg/L，；長(zhǎng)白茶藨和‘寒豐’為MS+BA1.0m

3、g/L+GA31.0-2.0mg/L。繼代周期以25-30天為宜，合適的接種密度為每瓶3-5株。3硝酸銀可以防止茶藨屬植物組培苗褐化。在培養(yǎng)基中加入0.5-5.0mg/L的硝酸銀，組培苗褐化率可控制在20﹪以下。 4用白糖可代替藨糖作為三種茶藨組培苗分化和增殖MS培養(yǎng)基的碳源。 5三種茶藨屬植物組培苗葉片或葉柄均能誘導(dǎo)出愈傷組織。其中長(zhǎng)白茶藨和‘寒豐’葉片采用MS+2，4-D0.8-1.0mg/L，長(zhǎng)白茶藨愈傷組織增殖培

4、養(yǎng)基可采用MS+2，4-D1.0mg/L、BA1.0mg/L+2，4-D0.5mg/L、MS+BA0.5mg/L+2，4-D1.0mg/L或附加CH500mg/L。楔葉茶藨葉片采用MS+BA0.5mg/L+2，4-D1.0mg/L，或MS+BA2.0mg/L+2，4-D2.5mg/L；葉柄采用MS+2，4-D2.0mg/L，或MS+BA1.0mg/L+2，4-D2.0mg/。其中楔葉茶藨愈傷組織再生出了不定芽。 61/2MS培養(yǎng)