肽基精氨酸脫亞氨酶4在腫瘤中表達(dá)的研究.pdf

1、研究背景：
　　 肽基精氨酸脫亞胺酶4(peptidylarginine deiminase4，PAD14)是一種翻譯后修飾酶，可在鈣離子存在的情況下將蛋白質(zhì)精氨酸殘基轉(zhuǎn)化為瓜氨酸殘基，此過(guò)程稱(chēng)為瓜氨酸化。瓜氨酸化后的蛋白往往改變其分子構(gòu)象，從而導(dǎo)致其生化活性發(fā)生改變。我們發(fā)現(xiàn)，PADI4在絕大多數(shù)惡性腫瘤及患者血液中都有特異高表達(dá)，國(guó)外實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)PADI4與P53組成分子開(kāi)關(guān)調(diào)控抑制癌基因的表達(dá)，可見(jiàn)，PADI4在腫瘤癌變過(guò)程

2、中起著非常重要的作用，并可能成為新的腫瘤標(biāo)記物。
　　 目的：
　　 本文在蛋白水平和mRNA水平上定量研究PADI4在多種腫瘤與癌旁組織中的表達(dá)差異，及在惡性腫瘤與良性腫瘤中的表達(dá)差異；研究PADI4在食管癌中的表達(dá)與臨床資料之間的相關(guān)性，并深入探討PADI4在食管癌致病過(guò)程中發(fā)揮的作用。
　　 方法：
　　 1．用免疫組化和免疫熒光的方法定性、定量研究PADI4在食管癌及癌旁(n=128)，結(jié)腸癌及癌

3、旁(n=64)，直腸癌及癌旁(n=53)，胃癌及癌旁(n=66)，肺癌及癌旁(n=112)，腎癌及癌旁(n=39)，乳腺癌(n=77)及乳腺增生(n=65)，子宮癌(n=158)及子宮肌瘤(n=54)，卵巢癌(n=65)及卵巢囊腺瘤(n=34)中表達(dá)量上的差異；用Western-blot和Real-time PCR定量分析PADI4蛋白水平和mRNA水平上在以上各種腫瘤中的表達(dá)水平。
　　 2．用免疫組化和免疫熒光法研究PADI

4、4在不同類(lèi)型食管癌癌組織與癌旁組織中表達(dá)量的差異，及表達(dá)量變化與臨床資料之間的關(guān)系；用Western-blot和Real-timePCR定量分析PADI4在蛋白水平和mRNA水平上不同類(lèi)型食管癌癌組織與癌旁組織中表達(dá)量的差異。
　　 結(jié)果：
　　 1．通過(guò)免疫組織化學(xué)法和免疫熒光法發(fā)現(xiàn)，PADI4在食管癌(75例，陽(yáng)性率100％)、胃癌(37例，100％)、結(jié)腸癌(39例，94．87％)、直腸癌(28例，89．29％)、

5、腎癌(27例，96．30％)、肺癌(59例，93．22％)癌組織中的表達(dá)量明顯高于癌旁組織(陽(yáng)性率依次為9．43％，31．03％，16％，16％，16．67％，3．77％)，P<0．05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。子宮癌(158例，陽(yáng)性率89．87％)、乳腺癌(77例，80．52％)、卵巢癌(65例，84．62％)中的表達(dá)量分別高于子宮肌瘤(54例，16．67％)、乳腺增生(65例，21．54％)、卵巢囊腺瘤(34例，14．71％)，P<0．05，

6、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。蛋白質(zhì)印跡法和Real-time PCR分別在蛋白水平和mRNA水平上證明以上結(jié)果。
　　 2．通過(guò)免疫組織化學(xué)法發(fā)現(xiàn)，PADI4在食管鱗癌(139例，陽(yáng)性率98．56％)、食管腺癌(16例，87．50％)和食管小細(xì)胞未分化癌(12例，91．67％)中高表達(dá)，在正常食管組織(16例，0％)中不表達(dá)。通過(guò)免疫熒光法定量分析PADI4在食管癌標(biāo)本中表達(dá)量與患者臨床指標(biāo)之間的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，PADI4在食管鱗癌中的表達(dá)量與腫瘤

7、病理分級(jí)呈正相關(guān)(P=0．009)，與臨床分期(P=0．853)，年齡(P=0．768)，性別(P=0．253)則不相關(guān)。蛋白質(zhì)印跡法和Real-time PCR分別在蛋白水平和mRNA水平上證明食管鱗癌和食管腺癌癌組織中PADI4的表達(dá)量顯著高于癌旁組織(P<0．05)。
　　 結(jié)論：
　　 PADI4在食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌、腎癌、肺癌癌組織中的表達(dá)量要高于癌旁組織，子宮癌、乳腺癌、卵巢癌惡性腫瘤中的表達(dá)量要高