人眼鞏膜組織中Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)與病理性近視的相關(guān)性研究.pdf

1、背景：病理性近視(path010gical myopia PM)又稱惡性近視(malignantmyopia)或高度近視(high myopia)，是指屈光度高于-6-OD的屈光不正，屬近視的一種亞型；常伴發(fā)眼后極部的變性改變，包括鞏膜變薄、脈絡(luò)膜萎縮變薄及眼軸的增長。在所有屈光不正中，病理性近視危害最大，可伴有弱視、青光眼、白內(nèi)障、玻璃體混濁、視網(wǎng)膜脫離等多種并發(fā)癥，多導(dǎo)致視力不佳，甚至最終失明。高度近視占近視人群的27﹪～33﹪，近

2、年來研究表明，病理性近視的發(fā)生發(fā)展與鞏膜細(xì)胞外基質(zhì)重塑有密切相關(guān)性，主要是膠原合成減少降解增加，最終導(dǎo)致鞏膜變薄，眼軸不斷延長眼球過度擴(kuò)張。由于鞏膜是近視發(fā)生時(shí)眼內(nèi)所有調(diào)控機(jī)制的最終靶組織，而膠原占鞏膜成分的絕大部分，其中大部分是Ⅰ型膠原(collagentype Ⅰ)，其對維持眼球的基本形態(tài)阻止病理性近視的發(fā)展有重要作用。因此本實(shí)驗(yàn)以Ⅰ型膠原蛋白作為研究對象，研究病理性近視鞏膜組織細(xì)胞外基質(zhì)中Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)量的改變和正常人眼前后極部

3、鞏膜組織細(xì)胞外基質(zhì)中Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)量的差異。 目的：分析病理性近視眼和非近視眼鞏膜組織細(xì)胞外基質(zhì)中Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)量的改變，以及正常人眼前后極部鞏膜組織細(xì)胞外基質(zhì)中Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)量的差異，探討其與病理性近視的相關(guān)性，為病理性近視的病因?qū)W研究提供新的思路和方法，從而探討通過干擾膠原的改變而防治病理性近視的方法。 方法：1.1)收集15例行抗青光眼手術(shù)的原發(fā)性丌角性青光眼(POAG)患者(伴有病理性近視)、15例行抗青

4、光眼手術(shù)的POAG患者(不伴有病理性近視)術(shù)中切除的鞏膜組織、15例自愿捐獻(xiàn)角膜的健康正常人眼(不伴有病理性近視前極部鞏膜)，其中由行抗青光眼手術(shù)的POAG患者(伴有病理性近視)術(shù)中切除的鞏膜組織作為病理性近視組，其余兩組為非病理性近視組：角膜移植供眼組(簡稱角移組)和青光眼組。2)收集 15 例自愿捐獻(xiàn)角膜的健康正常人眼鞏膜組織分別取材于前極部及后極部進(jìn)行比較。 2．收集各組鞏膜組織提取總蛋白，用western blot的方法檢測病理

5、性近視組和角移組(前極部)和青光眼組的Ⅰ型膠原蛋白，及角移組(后極部)的Ⅰ型膠原蛋白，應(yīng)用UVP凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行照相，并測定個(gè)樣本β-actin和Ⅰ型膠原蛋白電泳條帶灰度值，以β-actin電泳條帶為參照，求出個(gè)樣本Ⅰ型膠原蛋白電泳條帶灰度值和β-actin電泳條帶灰度值比值。 3．對所得數(shù)據(jù)采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)，配對設(shè)計(jì)的兩樣本均數(shù)檢驗(yàn)(Paired-Sample T Test)等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用S

6、PSS11.5系統(tǒng)統(tǒng)計(jì)分析軟件包進(jìn)行處理。 結(jié)果：在100KD處可見Ⅰ型膠原的蛋白條帶，在角移組(前極部)和青光眼組之間比較無顯著性差異(P>0.01)，而在病理性近視組明顯低于角移組(前極部)和青光眼組，兩組有極其顯著性差異(P<0.001)。角移組(后極部)明顯低于角移組(前極部)，兩組有極其顯著性差異(P<0.001)。 結(jié)論：病理性近視組與角移組(前極部)和青光眼組相比Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)量明顯降低，并且角移組(后