人眼鞏膜組織中Ⅰ型膠原蛋白表達與病理性近視的相關性研究.pdf

1、背景：病理性近視(path010gical myopia PM)又稱惡性近視(malignantmyopia)或高度近視(high myopia)，是指屈光度高于-6-OD的屈光不正，屬近視的一種亞型；常伴發(fā)眼后極部的變性改變，包括鞏膜變薄、脈絡膜萎縮變薄及眼軸的增長。在所有屈光不正中，病理性近視危害最大，可伴有弱視、青光眼、白內(nèi)障、玻璃體混濁、視網(wǎng)膜脫離等多種并發(fā)癥，多導致視力不佳，甚至最終失明。高度近視占近視人群的27﹪～33﹪，近

2、年來研究表明，病理性近視的發(fā)生發(fā)展與鞏膜細胞外基質(zhì)重塑有密切相關性，主要是膠原合成減少降解增加，最終導致鞏膜變薄，眼軸不斷延長眼球過度擴張。由于鞏膜是近視發(fā)生時眼內(nèi)所有調(diào)控機制的最終靶組織，而膠原占鞏膜成分的絕大部分，其中大部分是Ⅰ型膠原(collagentype Ⅰ)，其對維持眼球的基本形態(tài)阻止病理性近視的發(fā)展有重要作用。因此本實驗以Ⅰ型膠原蛋白作為研究對象，研究病理性近視鞏膜組織細胞外基質(zhì)中Ⅰ型膠原蛋白表達量的改變和正常人眼前后極部

3、鞏膜組織細胞外基質(zhì)中Ⅰ型膠原蛋白表達量的差異。 目的：分析病理性近視眼和非近視眼鞏膜組織細胞外基質(zhì)中Ⅰ型膠原蛋白表達量的改變，以及正常人眼前后極部鞏膜組織細胞外基質(zhì)中Ⅰ型膠原蛋白表達量的差異，探討其與病理性近視的相關性，為病理性近視的病因?qū)W研究提供新的思路和方法，從而探討通過干擾膠原的改變而防治病理性近視的方法。 方法：1.1)收集15例行抗青光眼手術的原發(fā)性丌角性青光眼(POAG)患者(伴有病理性近視)、15例行抗青

4、光眼手術的POAG患者(不伴有病理性近視)術中切除的鞏膜組織、15例自愿捐獻角膜的健康正常人眼(不伴有病理性近視前極部鞏膜)，其中由行抗青光眼手術的POAG患者(伴有病理性近視)術中切除的鞏膜組織作為病理性近視組，其余兩組為非病理性近視組：角膜移植供眼組(簡稱角移組)和青光眼組。2)收集 15 例自愿捐獻角膜的健康正常人眼鞏膜組織分別取材于前極部及后極部進行比較。 2．收集各組鞏膜組織提取總蛋白，用western blot的方法檢測病理

5、性近視組和角移組(前極部)和青光眼組的Ⅰ型膠原蛋白，及角移組(后極部)的Ⅰ型膠原蛋白，應用UVP凝膠成像系統(tǒng)進行照相，并測定個樣本β-actin和Ⅰ型膠原蛋白電泳條帶灰度值，以β-actin電泳條帶為參照，求出個樣本Ⅰ型膠原蛋白電泳條帶灰度值和β-actin電泳條帶灰度值比值。 3．對所得數(shù)據(jù)采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)，配對設計的兩樣本均數(shù)檢驗(Paired-Sample T Test)等統(tǒng)計學方法應用S

6、PSS11.5系統(tǒng)統(tǒng)計分析軟件包進行處理。 結果：在100KD處可見Ⅰ型膠原的蛋白條帶，在角移組(前極部)和青光眼組之間比較無顯著性差異(P>0.01)，而在病理性近視組明顯低于角移組(前極部)和青光眼組，兩組有極其顯著性差異(P<0.001)。角移組(后極部)明顯低于角移組(前極部)，兩組有極其顯著性差異(P<0.001)。 結論：病理性近視組與角移組(前極部)和青光眼組相比Ⅰ型膠原蛋白表達量明顯降低，并且角移組(后