岡村凹頂藻和9種軟體動(dòng)物的代謝產(chǎn)物分析.pdf

1、海洋物種資源豐富，屬于五個(gè)生物界、四十四個(gè)生物門，如此富饒的海洋物種資源為海洋天然產(chǎn)物的寶庫。海洋天然產(chǎn)物廣泛來源于微生物與浮游生物、苔蘚蟲類、海藻（褐藻、綠藻、紅藻）、海綿、腔腸動(dòng)物、軟體動(dòng)物、棘皮動(dòng)物、被囊動(dòng)物等。本文著眼于紅藻和軟體動(dòng)物進(jìn)行天然產(chǎn)物的探索。
　　凹頂藻屬(Laurencia)約135種，其中中國(guó)有37種，是屬于紅藻門、紅藻綱、仙菜目、松節(jié)藻科的海藻，主要分布于熱帶、亞熱帶和溫帶海區(qū)的潮間帶附近及深海部分。凹頂

2、藻次級(jí)代謝產(chǎn)物數(shù)量眾多，并且具有豐富的結(jié)構(gòu)類型，主要包括倍半萜、二萜、三萜和C15-聚乙酰等，多半次級(jí)代謝產(chǎn)物含有鹵素元素，其中一些凹頂藻次級(jí)代謝產(chǎn)物報(bào)道具有抗菌、細(xì)胞毒活性、拒食以及驅(qū)蟲等多種生物活性。本文對(duì)凹頂藻以近年來代謝產(chǎn)物的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，歸納例舉了部分具有新穎構(gòu)造、有生物活性的化合物。本文中岡村凹頂藻(L. okamurai)樣品采自中國(guó)廣東湛江。將干燥并粉碎的岡村凹頂藻樣品用甲醇、二氯甲烷等有機(jī)溶劑進(jìn)行提取，粗提取物再

3、用乙酸乙酯進(jìn)行萃取。獲得的乙酸乙酯相通過薄層層析、硅膠柱層析、凝膠柱層析（Sephadex LH-20）和半制備高效液相色譜（HPLC）等方法一步步分離提純，最終得到單體化合物。然后運(yùn)用1H NMR、13C NMR和質(zhì)譜等現(xiàn)代波譜技術(shù)來鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。從廣東湛江的岡村凹頂藻中共分離鑒定了2個(gè)化合物。
　　軟體動(dòng)物門有著巨大生物多樣性，其下分為八個(gè)不同的綱。軟體動(dòng)物為人類供應(yīng)了豐富的資源，比如食品、貝殼、染料和藥物。在世界上的很多

4、文化中，軟體動(dòng)物很長(zhǎng)時(shí)間以來是一個(gè)具有醫(yī)療效果的產(chǎn)物的來源。盡管有一些軟體動(dòng)物被殼，但大多數(shù)軟體動(dòng)物基本上都有柔軟部分，且部分物種營(yíng)濾食生活需大量接觸含有細(xì)菌和微生物的海水，使其易于受到捕食者和病原體的侵害。然而，軟體動(dòng)物像所有無脊椎動(dòng)物一樣，沒有獲得性免疫。這表明軟體動(dòng)物必須發(fā)展替代防御策略，來保護(hù)自己免受微生物的侵襲。在自然選擇的壓力下，一系列具有不同的抗菌，抗真菌，抗寄生蟲和抗病毒的次級(jí)代謝物在軟體動(dòng)物中發(fā)展。因而，對(duì)軟體動(dòng)物提取

5、物和次級(jí)代謝產(chǎn)物的生物活性的研究興趣越來越大。本文軟體動(dòng)物的樣品是分別從日本的北海道、東北、關(guān)東、中國(guó)四國(guó)等地采集的日本蜆（Corbicula japonica）、北寄貝
　　（Pseudocardium sachalinense）、蝦夷扇貝（Mizuhopectenyessoensis）、太平洋褶柔魚（Todarodes Pacificus）等。本文基于LC-MS/MS的分析數(shù)據(jù)比較分析了這9種軟體動(dòng)物的代謝產(chǎn)物。各樣品稱重后切

6、成小塊，使用Bligh/Dyer法或70％乙醇法進(jìn)行抽提，粗提取物經(jīng)減壓濃縮、冷凍干燥后稱重并調(diào)節(jié)濃度至10mg/ml備用。LC-MS/MS分析用樣品濃度調(diào)整為0.05mg/ml。分析比較LC-MS/MS的數(shù)據(jù)得到日本蜆和蝦夷扇貝與另外7種軟體動(dòng)物不同，含有較多分子量為549的特征化合物。經(jīng)凝膠柱層析（Sephadex LH-20）、薄層層析和示差檢測(cè)-高效液相色譜（RID-HPLC）等方法分離提純?cè)摶衔铮⒗?H NMR、13C

7、NMR和LC-MS/MS等現(xiàn)代波譜技術(shù)鑒定該化合物為麥芽三糖與甲酸的結(jié)合體。即日本蜆和蝦夷扇貝較其他軟體動(dòng)物來說含有大量的麥芽三糖。對(duì)于不同產(chǎn)地日本蜆的代謝產(chǎn)物分析得到，來自不同產(chǎn)地的日本蜆麥芽三糖的含量差異較大。推測(cè)麥芽三糖可作為日本蜆?biāo)菰春丸b定品質(zhì)的標(biāo)記化合物。對(duì)采集自日本函館、五島和廣島的太平洋褶柔魚進(jìn)行了代謝產(chǎn)物分析。產(chǎn)自不同產(chǎn)地的太平洋褶柔魚其代謝產(chǎn)物組成成分大致相同，不同之處在于某些特殊化合物，如章魚堿、242.1750/2