骨性關節(jié)炎關節(jié)軟骨相關分子的基因及蛋白表達研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分:骨關節(jié)炎關節(jié)軟骨相關分子的基因表達與臨床相關性研究。
   目的:通過分析骨性關節(jié)炎與股骨頸骨折患者的關節(jié)軟骨IL-1β,NFAT1,NFAT1B,TNFα,COL2A1,COL10A1,Aggrecan等分子的基因表達,尋找與OA病理過程相關的分子,從而為OA的治療提供新的途徑。
   方法:收集因骨性關節(jié)炎和股骨頸骨折而行全髖全膝關節(jié)置換或半髖置換的患者46例,取深部軟骨組織1.2g,保存于RNAL,ATE

2、R(Ambion)中,直到mRNA抽提(保存時間小于一周)。
   按Rneasy Fibrous Tissue Midi Kit(Qiagen,guangDong,China)試劑盒所述步驟抽提關節(jié)軟骨中總RNA,經(jīng)逆轉錄試劑盒(Takara)逆轉錄為cDNA(10μl體系),-20℃保存cDNA直到行PCR反應。實時定量PCR儀測定骨性關節(jié)炎與股骨頸骨折患者關節(jié)軟骨中IL-1β,NFAT1,NFAT1B,TNFα,COL2A

3、1,COL10A1及Aggrecan等分子的基因相對表達量,用2-△△分析結果。統(tǒng)計學分析股骨頸骨折和骨性關節(jié)炎患者、髖關節(jié)骨性關節(jié)炎和膝關節(jié)骨性關節(jié)炎、膝關節(jié)骨性關節(jié)炎不同階段的相關分子基因表達差別與臨床的相關性。
   結果:骨性關節(jié)炎患者IL-1β,NFAT1,NFAT1B,TNFα,COL2A1,COL10A1表達高于股骨頸骨折患者(P<0.05)。而Aggrecan表達骨性關節(jié)炎患者與股骨頸骨折患者無顯著性差異(P>0

4、.05)。髖關節(jié)骨性關節(jié)炎與膝關節(jié)骨性關節(jié)炎IL-1β,NFAT1,NFAT1B,TNFα,COL2A1,COL10A1和Aggrecan表達無顯著性差異(P>0.05)。膝關節(jié)骨性關節(jié)炎在不同階段基因表達差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
   結論:骨性關節(jié)炎患者關節(jié)軟骨中IL-1β,NFAT1,NFAT1B,TNFα,COL2A1,COL10A1等分子的基因表達水平較股骨頸骨折升高,提示這些分子在OA的病理過程中參與了重要

5、作用。
   第二部分:骨關節(jié)炎關節(jié)軟骨Col2A1和TNFα蛋白表達與臨床相關性研究。
   目的:比較骨性關節(jié)炎與股骨頸骨折患者的關節(jié)軟骨分子的蛋白表達差異,初步研究骨性關節(jié)炎關節(jié)軟骨退變相關因素,為OA治療提供理論基礎。
   方法:收集因髖關節(jié)骨性關節(jié)炎和股骨頸骨折而行全髖或半髖置換的患者18例,取深部軟骨組織,蛋白抽提液抽提總蛋白,保存于-80℃?zhèn)溆?。采用特異性抗TNF-α,COL2A1-抗及二抗抗體,

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