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1、目的:惡性腫瘤的本質(zhì)在于細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控,細(xì)胞呈無限期的分裂和增殖。細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子cyclin D1和Cyclin E參與了DNA復(fù)制過程的起始;p27作為重要的細(xì)胞周期負(fù)性調(diào)控蛋白,參與阻滯細(xì)胞周期于G1期。本研究擬探討細(xì)cyclin D1、cyclin E和P27在腎盂移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義。 方法:選取42例經(jīng)手術(shù)切除并病理證實、臨床資料完整的腎盂移行細(xì)胞癌石蠟標(biāo)本,每個石蠟標(biāo)本制成5μm厚連續(xù)切片5張,1張行HE染色
2、進(jìn)行分期;3張切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)方法(兩步法)染色,一抗分別應(yīng)用鼠抗P27單克隆抗體和鼠抗cyclin D1、cyclin E單克隆抗體;另1張以PBS代替一抗作陰性對照。8例正常腎盂組織的切片作為陰性對照。顯微鏡下觀察細(xì)胞著色情況,cyclin D1、cyclin E和p27蛋白陽性表達(dá)產(chǎn)物為突出于背景的棕黃色或棕褐色細(xì)顆粒,定位于細(xì)胞核。400倍光鏡下,隨機選取10個視野,每個視野計數(shù)100個細(xì)胞,共計1000個細(xì)胞,以此計算陽性
3、細(xì)胞計數(shù),根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)判斷結(jié)果并進(jìn)行統(tǒng)計分析。 結(jié)果: cyclin D1和cyclin E蛋白的表達(dá)陽性部位均位于細(xì)胞核。本組資料顯示cyclin D1在正常腎盂和輸尿管組織中呈弱表達(dá),在腎盂移行細(xì)胞癌組織中的表達(dá)明顯增強,且隨病理分期和組織學(xué)分級增高而增高。Cyclin E在正常對照組中無表達(dá),在腫瘤中的表達(dá)隨病理分期和組織學(xué)分級增高而增高。P27蛋白表達(dá)陽性部位位于細(xì)胞核。本組資料顯示P27蛋白表達(dá)在腎盂移行細(xì)胞癌不同病
4、理分期及正常對照組織中差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。在正常組織中呈陽性表達(dá),在腎盂移行細(xì)胞癌組織中明顯減低,且隨病理分期和組織學(xué)分級增高而降低。cyclin D1的表達(dá)與p27的表達(dá)在腎盂移行細(xì)胞癌組織分化程度、TNM分期方面呈負(fù)相關(guān)。cyclin E的表達(dá)與p27的表達(dá)在腎盂移行細(xì)胞癌組織分化程度、TNM分期方面呈負(fù)相關(guān)。 結(jié)論:本實驗中發(fā)現(xiàn)p27陽性表達(dá)率與cyclin D1、cyclin E陽性表達(dá)率之間存在反向關(guān)系,即p27陽性表
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