姜黃素對Ⅱ型糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠P-NR2B、P-NR1及P-AKT表達的影響.pdf

1、目的:觀察腹腔注射姜黃素對Ⅱ型糖尿病神經(jīng)病理性疼痛(DNP)大鼠痛閾和脊髓背角中p-NR2B、p-NR1、p-AKT及背根神經(jīng)節(jié)(DRG)中p-AKT表達的影響。
　　方法:高糖高脂飼料喂養(yǎng)SD大鼠（高糖高脂組，H組）8周誘導(dǎo)胰島素抵抗，繼以單次小劑量鏈脲佐菌素(STZ)35mg/kg腹腔注射，3d后血糖≥16.7mmol/l者入選為Ⅱ型糖尿病(T2DM)大鼠。在注射STZ14d后機械痛閾(MWT)、熱敏痛閾(TWL)低于基礎(chǔ)值8

2、0％的大鼠為Ⅱ型糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠，將其隨機分為3組(n=27): DNP組、DNP+姜黃素組（DCur組）、DNP+溶劑組(DSC組)。DCur組和DSC組于注射STZ14d后分別腹腔注射姜黃素100mg/kg/d和玉米油4ml/kg/d，連續(xù)注射14d。另取27只為正常對照組（C組），予普通飼料喂養(yǎng)。給姜黃素或玉米油3、7、14d后測各組大鼠MWT與TWL，并在同時間點取L4-6脊髓和DRG，用免疫組化和免疫印跡法測定脊髓背角

3、中p-NR2B、p-NR1、p-AKT及DRG中p-AKT的表達。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠血糖、胰島素濃度及胰島素敏感指數(shù)的變化:與C組比較，H組大鼠飼養(yǎng)8周后血糖升高，但沒有達到糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)(C組:5.46±1.19 mmol/l，H組:6.23±0.82 mmol/l)，而在注射STZ3d后明顯升高(C組:5.75±0.99 mmol/l，H組:21.00±3.60 mmol/l，P＜0.05)。飼養(yǎng)8周后，空腹胰島

4、素濃度明顯升高(C組:6.70±1.41 mIU/l，H組:12.76±3.77 mIU/l，P＜0.05)，胰島素敏感指數(shù)明顯下降(C組:-1.40±0.33，H組:-2.25±0.47，P＜0.05)。
　　2.痛閾的變化:注射STZ前四組大鼠的MWT、TWL基礎(chǔ)值無顯著差異(C組:50.94±3.38g、14.13±1.49s; DNP組:50.97±3.13g、14.13±2.03s;DCur組:51.61±3.34g、1

5、4.54±1.97s; DSC組:50.39±4.05g、14.34±1.76s）。注射STZ后，與C組相比，DNP組、DCur組、DSC組的MWT值降低，TWL值縮短(P＜0.05)，且持續(xù)至注射STZ28d后。與DNP組相比，DCur組在給藥3d后開始出現(xiàn)MWT和TWL升高，但兩組差異尚無統(tǒng)計學(xué)意義，7d和14d后則顯著升高(P＜0.05)。DSC組與DNP組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3.脊髓背角中p-NR2B蛋白的表達情況

6、:(1)免疫組化結(jié)果顯示:與C組相比，DNP組大鼠各時間點脊髓背角中p-NR2B陽性細胞明顯增多(P＜0.05)，而DCur組大鼠在給藥3d后脊髓背角中p-NR2B陽性細胞較DNP組有所減少，并持續(xù)至給藥14d后(P＜0.05)，DSC組與DNP組p-NR2B陽性細胞的表達則無顯著差異。(2)免疫印跡結(jié)果顯示:與C組相比，DNP組大鼠各時間點脊髓背角中p-NR2B出現(xiàn)表達上調(diào)(P＜0.05);與DNP組相比，DCur組在給藥3d后脊髓背

7、角中p-NR2B出現(xiàn)表達下調(diào)，并持續(xù)至給藥14d后(P＜0.05); DSC組和DNP組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4.脊髓背角中p-NR1蛋白的表達情況:(1)免疫組化結(jié)果顯示:四組大鼠脊髓背角p-NR1陽性細胞的表達無明顯差異。(2)免疫印跡結(jié)果顯示:四組大鼠脊髓背角p-NR1的表達無顯著差異。
　　5.脊髓背角和DRG中p-AKT蛋白的表達情況:免疫印跡結(jié)果顯示:與C組相比，DNP組大鼠各時間點脊髓背角和DRG中p-A