PCNA、EGFR在2型糖尿病雄性SD大鼠睪丸組織的表達(dá)及相關(guān)因素分析.pdf

1、目的:近年來,由于生活水平的提高、飲食結(jié)構(gòu)的改變、日趨緊張的生活節(jié)奏以及少動(dòng)的生活方式等諸多因素的影響,全球糖尿病發(fā)病率增長迅速,成為繼心腦血管疾病、腫瘤之后又一嚴(yán)重危害大眾健康的慢性非傳染性疾病。生殖系統(tǒng)功能障礙是糖尿病并發(fā)癥之一,其發(fā)病率是非糖尿病病人的5～10倍,給患者的身心健康帶來了嚴(yán)重的壓力和困擾,近年來越來越受到重視。本研究主要通過建立2型糖尿病模型大鼠探討兩種影響生殖功能的因子,PCNA及EGFR在正常及不同病程糖尿病SD

2、大鼠睪丸功能的影響,并觀察睪丸形態(tài),為T2DM雄性生殖功能障礙的發(fā)病機(jī)制和治療提供一定的理論依據(jù)。
　　 方法:健康雄性SD大鼠30只,每日均自由飲水、進(jìn)食飼料,隨機(jī)分為3組:正常組(N組,10只),每日予生理鹽水灌胃作對照；T2DM4周組(A組,10只)和T2DM8周組(B組,10只),每日予脂肪乳(高糖高脂飲食)灌胃。第7周末測定血清胰島素,并進(jìn)行比較；次日清晨稱取動(dòng)物體重。實(shí)驗(yàn)組空腹予小劑量鏈脲佐菌素(STZ,Sigma公

3、司)按30mg/kg體重尾靜脈注射誘導(dǎo)2型糖尿病模型；而正常對照組大鼠予等量無菌枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液尾靜脈注射。以FPG≥16.7mmol/L為診斷糖尿病大鼠的標(biāo)準(zhǔn),實(shí)驗(yàn)組大鼠于第8周造模成功,成模后A組、B組繼續(xù)維持高糖高脂飲食,A組于T2DM4周后處死,B組于T2DM8周后即實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)處死；N組與A組同期處死。斷尾取血,并用羅氏血糖儀測定血糖值；腹主動(dòng)脈取血離心后血清待測胰島素、糖化血清蛋白、睪酮、血脂等。放免法檢測血清胰島素；比

4、色法檢測糖化血清蛋白；化學(xué)發(fā)光法測定血清睪酮；取雙側(cè)睪丸待免疫組化SABC法檢測睪丸組織EGFR、PCNA表達(dá),并行相關(guān)因素分析。數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理。
　　 結(jié)果:A,B組大鼠空腹血糖水平、胰島素抵抗指數(shù)高于N組大鼠,且差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.05)；糖化血清蛋白隨病程升高,三組間都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P<0.05,P<0.05,P<0.05)；B組大鼠的胰島素水平較N組及A組大鼠有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義升高

5、(分別為P=0.001,P=0.036);A,B組大鼠的體重與N組大鼠相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義降低(P<0.05)； A、B組大鼠睪丸重量、血清睪酮較N組都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義下降(P<0.05,P<0.05)。睪丸免疫組化顯示PCNA免疫陽性物呈棕黃色顆粒,主要是精原細(xì)胞和初級精母細(xì)胞,支持細(xì)胞也有著色；EGFR在精母細(xì)胞、精子細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞和支持細(xì)胞均呈陽性反應(yīng)。A、B組大鼠睪丸PCNA和EGFR陽性率明顯低于N組大鼠(P<0.05,P<0.05

6、),PCNA和EGFR與血糖呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為-0.665(P<0.05),-0.540(P=0.002)；PCNA、EGFR與睪丸重量呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為r=0.496(P=0.009),r=0.454(P=0.012)；PCNA、EGFR與血清睪酮水平呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別是r=0.574(P=0.001),r=0.428(P=0.018)。
　　 結(jié)論:(1)脂肪乳灌胃(高糖高脂飲食)7周加小劑量一次尾靜脈注射

7、STZ可以成功誘導(dǎo)SD大鼠的2型糖尿病模型,方法可靠,可全部成模；(2)PCNA及EGFR在糖尿病雄性SD大鼠睪丸組織的表達(dá)較正常組雄性SD大鼠睪丸組織表達(dá)顯著減少;(3)糖尿病雄性SD大鼠睪丸的重量及血清睪酮的水平較正常組大鼠是顯著減少；(4)SD雄性大鼠睪丸組織PCNA及EGFR表達(dá)與血糖是呈負(fù)相關(guān)的；(5)大鼠睪丸PCNA、EGFR表達(dá)與睪丸重量及血清睪酮水平呈正相關(guān)?？傊?PCNA及EGFR在糖尿病雄性SD大鼠睪丸表達(dá)減少,通過