丹芍顆粒通過(guò)調(diào)節(jié)NF-κB-IκB及MMP-2的表達(dá)抑制系膜增生的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：研究不同劑量的丹芍顆粒含藥血清對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞增殖后NF-κB p65、IκB、MMP-2等因子的調(diào)控作用，探討不同劑量丹芍顆粒治療過(guò)敏性紫癜性腎炎的機(jī)制。
　　方法：體外培養(yǎng):LPS誘導(dǎo)大鼠系膜細(xì)胞(HBEH)增殖，采用不同劑量丹芍顆粒含藥血清進(jìn)行干預(yù)，24小時(shí)后收集細(xì)胞，western blotting法測(cè)定NF-κB p65、IκB、MMP-2等因子的蛋白表達(dá)情況;PCR法測(cè)定NF-κB p65mRNA

2、的表達(dá)情況;各組細(xì)胞經(jīng)免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色法處理后，其MMP-2蛋白表達(dá)情況通過(guò)激光共聚焦顯微鏡觀察。
　　結(jié)果：1.Western blotting法顯示:LPS誘導(dǎo)HBEH細(xì)胞增殖后，NF-κB p65蛋白表達(dá)升高(P＜0.05);與LPS組相比較，各含藥血清組NF-κB p65蛋白表達(dá)量下降(P＜0.05)。由此可知，含藥血清組能降低LPS誘導(dǎo)的HBEH細(xì)胞增殖后NF-κB p65蛋白的表達(dá)。2.Western blotti

3、ng法顯示:LPS誘導(dǎo)HBEH細(xì)胞增殖后，IκB蛋白表達(dá)下降(P＜0.05);與LPS組相比較，各含藥血清組IκB蛋白表達(dá)量上升(P＜0.05)。由此可知，含藥血清組能增高LPS誘導(dǎo)的HBEH細(xì)胞增殖后IκB蛋白的表達(dá)。3.Western blotting法顯示:LPS誘導(dǎo)HBEH細(xì)胞增殖后，MMP-2蛋白表達(dá)升高（P＜0.05）;與LPS組相比較，低劑量含藥血清組MMP-2蛋白表達(dá)量下降(P＜0.05)。由此可知，低劑量含藥血清組能降

4、低LPS誘導(dǎo)的HBEH細(xì)胞增殖后MMP-2蛋白的表達(dá)。4.PCR法顯示:LPS誘導(dǎo)HBEH細(xì)胞增殖后，NF-κB p65mRNA表達(dá)升高(P＜0.05);與LPS組相比較，各含藥血清組NF-κB p65mRNA表達(dá)量下降（P＜0.05）。由此可知，含藥血清組能降低LPS誘導(dǎo)的HBEH細(xì)胞增殖后NF-κB p65mRNA的表達(dá)。5.免疫熒光法顯示:正常組核內(nèi)幾乎不見(jiàn)熒光表達(dá)，提示正常組HBEH細(xì)胞核內(nèi)幾乎沒(méi)有MMP-2蛋白表達(dá);LPS組細(xì)