新型甘藍(lán)型油菜主要脂肪酸性狀的篩選及其關(guān)聯(lián)位點(diǎn)分析.pdf

1、甘藍(lán)型油菜種子的脂肪酸組分主要有8種，分別為棕櫚酸(C16∶0)、硬脂酸(C18∶0)、油酸(C18∶1)、亞油酸(C18∶2)、亞麻酸(C18∶3)、花生酸(C20∶0)、廿碳烯酸(C20∶1)、芥酸(C22∶1)。在雙低甘藍(lán)型油菜種子中油酸、亞油酸和亞麻酸之和占脂肪酸總和的90％左右，是種子中重要的三種脂肪酸組分，不同脂肪酸組分所占的比例決定著其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和用途，同時(shí)篩選高油酸材料可以作為高品質(zhì)菜籽油或者生物柴油的育種資源，篩選高亞油

2、酸、高亞麻酸材料可以作為營(yíng)養(yǎng)保健品的原材料，預(yù)防和治療多種疾病。
　　在普通甘藍(lán)型油菜中，油酸大于80.00％的種質(zhì)資源和亞油酸大于40.00％、亞麻酸大于15.00％，或亞油酸和亞麻酸之和大于50.00％的種質(zhì)資源十分有限，遺傳基礎(chǔ)廣泛的新型種質(zhì)資源可能為篩選獲得這些具有特殊性狀的材料提供豐富的素材。本研究以本實(shí)驗(yàn)室創(chuàng)建的具有大量埃塞俄比亞芥Cc亞基因組成分和白菜型油菜Ar亞基因組成分導(dǎo)入的遺傳變異非常豐富的新型甘藍(lán)型油菜輪回選

3、擇群體、高世代自交系和DH系為實(shí)驗(yàn)材料，利用近紅外分析儀(NIRS)和氣相色譜儀(GC)分析不同群體、不同世代材料中種子的脂肪酸組分，開(kāi)展主要脂肪酸材料的篩選、純化及作圖群體的構(gòu)建，旨在利用新型甘藍(lán)型油菜基因資源庫(kù)篩選獲得具有高不飽和脂肪酸的材料，并理解其遺傳基礎(chǔ)。以下是本研究所得到的具體結(jié)果:
　　1.為了得到種子中準(zhǔn)確的脂肪酸組分結(jié)果，基于提取擬南芥種子脂肪酸的方法，在試劑用量和種子用量上稍作改良，對(duì)甘藍(lán)型油菜種子脂肪酸進(jìn)行萃

4、取。通過(guò)利用本實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)的兩個(gè)甘藍(lán)型油菜品種材料(Ningyou7、Tapidor)設(shè)置不同的種子粒數(shù)進(jìn)行三次重復(fù)試驗(yàn)，最終確定用15粒種子進(jìn)行萃取種子脂肪酸，結(jié)果準(zhǔn)確而且節(jié)約種子。
　　2.以3930份新型甘藍(lán)型油菜輪回選擇群體的F2種子為實(shí)驗(yàn)材料，經(jīng)過(guò)2-3輪近紅外分析和氣相色譜分析，在F3代高油酸的種子中，篩選到10份種子的油酸大于75.00％，其中有2份大于80.00％，分別為80.38％和80.97％;在F4代種子中，沒(méi)

5、有篩選到油酸超過(guò)75.00％的種子。在F3代高亞油酸、亞麻酸的種子中，篩選到2份種子的亞油酸與亞麻酸之和大于45.00％，分別為45.45％和49.25％;在F4代高亞油酸、亞麻酸的種子中，篩選到34份種子的亞油酸與亞麻酸之和大于45.00％，其中有12份達(dá)到了50.00％以上，最高的為57.38％。
　　3.用GC對(duì)119份新型甘藍(lán)型油菜高世代自交系種子進(jìn)行脂肪酸組分分析。利用SPSS軟件對(duì)8種脂肪酸組分進(jìn)行相關(guān)性分析。利用60

6、K芯片的24877個(gè)SNP標(biāo)記，對(duì)119份新型甘藍(lán)型油菜高世代自交系的脂肪酸組分，在四種模型(GLM、Q、K和MLM)下進(jìn)行全基因組關(guān)聯(lián)分析(GWAS)。最終檢測(cè)到2個(gè)與油酸顯著關(guān)聯(lián)的位點(diǎn)，分別位于A9和C6上;檢測(cè)到15個(gè)與芥酸顯著關(guān)聯(lián)的位點(diǎn)分別位于A1、A2、A6、A9、C1和C6上，并且位于A9和C6上的2個(gè)位點(diǎn)是油酸和芥酸的共定位點(diǎn)。
　　4.為了構(gòu)建亞油酸與亞麻酸之和的DH分離群體，利用篩選到的1份具有最高亞油酸、亞麻酸