通陽法改善肝竇毛細血管化大鼠痰瘀交阻狀態(tài)的機制研究.pdf

1、目的: 從陽氣失于條達暢通的角度探討痰瘀同病的發(fā)病機理和治療法則。期望建立一種中醫(yī)“痰瘀交阻”狀態(tài)的直觀病理模型，觀察通陽藥物對模型大鼠肝組織病理形態(tài)的影響，并進而通過觀察其對模型大鼠膠原沉積、基質金屬蛋白酶及其抑制因子、肝功能、血脂等指標的影響從陽氣的暢通和條達兩個層面對通陽法改善痰瘀交阻狀態(tài)的機制進行探討。 方法: 1．SD雄性大鼠50只，隨機選取7只作為正常組，其余大鼠給予酒脂混合物灌胃至第111天后，對剩

2、余大鼠改用40％CCL40.3ml/100g于大鼠大腿內側皮下注射造模，連續(xù)4周后超微電鏡下觀察模型大鼠肝組織，以評價肝竇毛細血管化模型，作為后續(xù)研究的基礎。 2．在注射造模的同時，將34只SD大鼠隨機分為模型組9只、蔥白提取物組(簡稱蔥白組)9只，中藥對照組7只、西藥對照組9只，并立即分別予生理鹽水、蔥白混懸液、秋水仙堿混懸液、丹參注射液灌胃。給藥19周后采用免疫組化法檢測大鼠肝組織CIV的表達，western-blot法檢測

3、肝組織MMP-2、TIMP-2的蛋白表達，RT-PCR法檢測肝組織中MMP-2mRNA、TIMP-2mRNA的表達，放免法檢測大鼠血LN、HA、PIIIP、CIV的含量，樣本堿水解法檢測肝組織HyP含量，生化法檢測大鼠肝功能和血脂的變化。 結果: 1．免疫組化法顯示CIV在正常組大鼠肝組織有弱表達，在模型組有非常強的表達；各治療組CIV的表達明顯弱于模型組．Western-Bolt法顯示模型組及各治療組大鼠肝組織CIV的

4、表達量較正常組均顯著增加；各治療組CIV的表達量較模型組均有明顯降低；蔥白治療組大鼠肝組織CIV的表達量較中、西藥對照組明顯降低。 2．樣本堿水解法檢測結果表明蔥白提取物能明顯降低模型大鼠肝組織HyP的含量；對照西藥沒有明顯地降低模型大鼠肝組織HyP的含量。 3．放免法檢測結果表明模型組大鼠血中LN、HA、PIIIP、CIV的含量均較正常組均顯著升高；各治療組能顯著降低此四項指標的含量。 4．Western—Bl

5、ot法和RT—PCR法的結果顯示模型大鼠肝組織MMP-2的蛋白水平和基因水平較正常組顯著增高，蔥白提取物能降低其表達。模型大鼠肝組織TIMP-2的蛋白水平和基因水平較正常組顯著增高，蔥白提取物能降低其表達。 5．生化法檢測結果表明模型組大鼠血ALT、AST含量較正常組明顯升高；ALB的含量及A/G值較正常組明顯降低。對照中藥及蔥白提取物相比對照西藥有更好的改善模型大鼠肝功能的作用。 6．生化法檢測結果表明模型組大鼠血TC

6、、TG、HDL—C、LDL—C的含量較正常組明顯降低。對照中藥及蔥白提取物均有升高模型大鼠血TC、TG、HDL—C、LDL—C的含量的作用，其中蔥白提取物有非常顯著的升高HDL—C的作用。對照西藥未能改善上述指標。 結論: 1．針對痰瘀同病的成因和治療提出新觀點：①關于痰瘀同病的成因，提出“陽氣之失于條達暢通是痰瘀交阻狀態(tài)發(fā)生和發(fā)展的關鍵機制之一”；②關于痰瘀同病的治法：通陽法不失為除化痰、活血之外治療痰瘀同病的又一治法

7、。③對通陽法的理解：通陽，一指暢通陽氣的運行，對有形之痰瘀阻塞能起到推解、疏通的作用；二指通過恢復或激活陽氣的條達，來阻斷病情的循環(huán)加重、引導不良的病理機轉向良性循環(huán)恢復，進而使各臟腑經(jīng)絡的功能得以正常發(fā)揮。 2．率先從組織形態(tài)學層面建立了中醫(yī)“痰瘀交阻”狀態(tài)的直觀病理模型；并圍繞上述觀點，通過病理學檢測證實通陽藥物蔥白提取物能改善肝竇毛細血管化SD大鼠痰瘀交阻狀態(tài)。進一步實驗證明通陽藥物蔥白提取物對有形痰瘀的暢通機制可能與其減