VEGF和PDGFB受體酪氨酸激酶抑制劑對小鼠角膜新生血管抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、正常角膜是透明無血管的,周圍血管止于角膜緣。在感染、外傷或免疫反應(yīng)等病理狀態(tài)下,毛細(xì)血管由角膜緣向角膜內(nèi)生長,形成角膜新生血管(corneal neovascularization CNV)。雖然新生血管對清除炎癥、傷口愈合、抑制角膜融解等有一定促進(jìn)作用,但角膜新生血管可嚴(yán)重影響視力,破壞角膜正常微環(huán)境而使前房相關(guān)免疫偏離(anterior chamber-associated immune devimion)消失,從而顯著增加角膜移植

2、術(shù)后的排斥發(fā)生率,排斥率可高達(dá)90％[1]。在我國,僅眼外傷所致的CNV就約占整個(gè)角膜疾病的10％[2]。就上海地區(qū)而言,復(fù)旦大學(xué)眼耳鼻喉科醫(yī)院每年所進(jìn)行的500多例各類角膜手術(shù)中,超過2/3的患者有角膜新生血管。另外,還有不少患者因嚴(yán)重的角膜血管化而失去手術(shù)機(jī)會(huì)。雖然科研人員進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)與臨床研究,角膜新生血管引起的失明及其伴隨的角膜移植術(shù)后的高排斥率仍然是眼表疾病領(lǐng)域急待解決的棘手問題。
　　 新生血管主要由三部分構(gòu)成:

3、內(nèi)皮細(xì)胞、周細(xì)胞和基底膜[3]。其形成的實(shí)質(zhì)是內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和重組的過程。血管發(fā)生的步驟為:a)血管內(nèi)皮細(xì)胞、周細(xì)胞的活化;b)基底膜的降解;c)活化血管內(nèi)皮細(xì)胞、周細(xì)胞的遷移與增生;d)新生毛細(xì)血管腔的形成;e)新生毛細(xì)血管周邊周細(xì)胞的出現(xiàn);f)新生基底膜的形成;g)毛細(xì)血管環(huán)的形成。
　　 既往的研究表明,在錯(cuò)綜復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制中,血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor VE

4、GF)被認(rèn)為是新生血管發(fā)生、發(fā)展中起關(guān)鍵作用的因子[4-7]。在病理情況下,VEGF異常高表達(dá),導(dǎo)致其靶細(xì)胞血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和活化?；罨膬?nèi)皮細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)等降解基底膜和細(xì)胞外基質(zhì),使自身游離并開始遷移,從而引起新生血管的出芽生長。因此,各種治療角膜新生血管的靶點(diǎn)也集中在抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移方面。多種針對VEGF途徑的抗新生血管治療取得了一定的成效[8-10]

5、。但是在新生血管形成的晚期,阻斷VEGF途徑并不能有效抑制已形成的新生血管。由于抗VEGF治療新生血管的局限性,血管周細(xì)胞在血管形成中的作用和意義逐漸為人們所重視。
　　 根據(jù)Cursiefen對196例新生血管化角膜的病理研究結(jié)果顯示[11],在新生血管形成的2周左右,約80％的新生血管有周細(xì)胞包裹?；A(chǔ)研究表明,血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌血小板衍生因子-B(PDGFB),而周細(xì)胞的胞膜上有PDGFR-β受體。通過PDGFB與受體結(jié)合,

6、周細(xì)胞被募集在血管內(nèi)皮細(xì)胞周圍,與此同時(shí)周細(xì)胞可分泌VEGF,通過旁分泌的方式作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞,以維持血管內(nèi)皮細(xì)胞的穩(wěn)定[12]。兩種細(xì)胞相互作用實(shí)現(xiàn)“共生”。周細(xì)胞的出現(xiàn),是新生血管“成熟”的標(biāo)志。在這個(gè)階段,血管內(nèi)皮細(xì)胞對外源性VEGF的依賴大大降低[11]。這也是在新生血管形成的晚期,單純通過抑制VEGF通路療效不佳的原因之一。另外,血管內(nèi)皮細(xì)胞和周細(xì)胞還通過彼此間直接接觸進(jìn)行調(diào)節(jié),通過這種調(diào)節(jié),周細(xì)胞可對血管生成起控制作用。<

7、br>　　 因此,通過阻斷PDGFB的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),抑制血管周細(xì)胞在內(nèi)皮細(xì)胞外的集聚,使周細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞失去接觸,失去周細(xì)胞支持的內(nèi)皮細(xì)胞,一旦失去VEGF的刺激將發(fā)生細(xì)胞凋亡,而最終導(dǎo)致新生血管退化。這個(gè)推論在抑制腫瘤新生血管方面得到初步證實(shí)[14-16]。
　　 VEGF和PDGFB通過其相應(yīng)受體發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。這兩類都是跨膜受體,其胞內(nèi)段有酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域,屬于受體酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase