高壓氧及促紅細胞生成素治療對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的神經(jīng)保護作用.pdf

1、目的：探討高壓氧(HBO)和促紅細胞生成素(EPO)早期干預治療對新生鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)后內(nèi)源性神經(jīng)干細胞激活及其向神經(jīng)元分化影響的動態(tài)變化，以及學習記憶功能改善情況。
　　 方法：選擇7日齡新生Wistar大鼠制備新生鼠HIBD模型，設置假手術組、HIBD對照組、HBO治療組、EPO治療組和HBO4+EPO聯(lián)合治療組。HE染色光鏡下觀察腦組織病理改變：通過免疫組化方法和計算機圖像分析技術檢測各組大鼠不同時點(術后4

2、d、7d、14d、21d)海馬齒狀回(DG)巢蛋白(Nestin)、海馬CA1區(qū)生長相關蛋白(GAP-43)、海馬LMOL區(qū)膠質纖維酸性蛋白(GFAP)的表達變化；及采用Morris水迷宮檢測各組大鼠的學習記憶功能。
　　 結果：1.腦組織病理改變：假手術組大鼠腦組織無異常病理改變；HIBD對照組大鼠海馬錐體細胞層次減少、排列紊亂，術后4～7d出現(xiàn)膠質細胞增生，大量神經(jīng)細胞核固縮、碎裂，術后14～21d大量神經(jīng)元丟失，膠質瘢痕形

3、成；HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組大鼠腦病理改變較HIBD對照組明顯減輕。2.Nestin表達：各時點HIBD對照組nestin陽性細胞數(shù)較假手術組增加(P<0.01)；HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組nestin陽性細胞數(shù)均較HIBD對照組增加(P<0.01)，EPO治療組nestin陽性細胞數(shù)與HBO治療組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；HBO+EPO聯(lián)合治療組較同時點HBO治療組、E

4、PO治療組增加，在術后4d、7d比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但在術后14d、21d比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。3.海馬GAP-43的表達：各時點對照組CA1區(qū)GAP-43表達較假手術組增強，于術后7d達高峰，兩組比較差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；各治療組GAP-43表達較對照組明顯增強，聯(lián)合治療組增強最明顯，于術后14d達高峰，EPO治療組GAP-43表達與HBO治療組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；H

5、BO+EPO聯(lián)合治療組較同時點HBO治療組、EPO治療組增加，在術后4d、7d、14d比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但在術后21d比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。4.海馬GFAP的表達：各時點對照組GFAP表達較假手術組增強，兩組比較差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；各治療組GFAP表達較對照組明顯增強，聯(lián)合治療組增強最明顯，于術后14d達高峰，EPO治療組GFAP表達與HBO治療組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)

6、；HBO+EPO聯(lián)合治療組較同時點HBO治療組、EPO治療組增加，在術后4d、7d、14d比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但在術后21d比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。5、學習記憶能力：假手術組、HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組與HIBD對照組比較，逃避潛伏期明顯縮短，HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組三組間逃避潛伏期無顯著性差異，假手術組與HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO

7、聯(lián)合治療組比較，逃避潛伏期明顯縮短；假手術組、HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組穿環(huán)指數(shù)高于對照組，HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組三組間穿環(huán)指數(shù)無顯著性差異，假手術組穿環(huán)指數(shù)高于HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組(P<0.05)。
　　 結論：1.EPO及HBO早期干預治療可減輕新生鼠HIBD后神經(jīng)細胞的變性、壞死；2.新生鼠缺氧缺血性腦損傷后腦缺血易損傷區(qū)Nestin、

8、GAP-43、GFAP的表達增加，可能與腦損傷后內(nèi)源性神經(jīng)干細胞激活、神經(jīng)再生和突觸重塑有關；3、早期給予HBO及外源性EPO治療可增加新生鼠HIBD后中樞神經(jīng)系統(tǒng)的Nestin、GAP-43、GFAP表達，HBO與EPO聯(lián)合治療增加更明顯；并且可以改善新生鼠HIBD后的學習記憶功能；4、HBO及外源性EPO治療對新生鼠缺氧缺血腦損傷的神經(jīng)修復和再生具有保護作用，為臨床上應用HBO及EPO治療新生兒窒息后腦損傷，減少神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥提供了