缺氧對大鼠腦線粒體氧化呼吸功能和ANT活性及異構(gòu)體表達(dá)的影響.pdf

1、該研究將健康雄性Wistar大鼠暴露于模擬海拔5000米高原低壓艙內(nèi),23小時(shí)/天,分別連續(xù)缺氧1天(H1)、5天(H5)、15天(H15)和30天(H30),同時(shí)設(shè)立平原對照組.各缺氧組與對照組分別在模擬高原低壓艙內(nèi)和平原斷頭處死,差速離心分離大鼠腦線粒體,Clark氧電極法測定線粒體呼吸活性,HPLC分析線粒體內(nèi)腺苷酸含量,抑制劑(CAT)滴定法定量ANT對氧耗速率的控制度以及估計(jì)線粒體ANT載體密度,H<'3>-ADP攝入法測定A

2、NT的轉(zhuǎn)運(yùn)速率,熒光定量RT-PCR檢測ANT1、ANT2mRNA表達(dá)量,Western blot測定ANT蛋白表達(dá).主要結(jié)果和結(jié)論如下:結(jié)論:1.缺氧可顯著抑制腦線粒體的氧化磷酸化功能,降低電子傳遞速率和呼吸氧耗,而增加不伴有ATP生成的"無效氧耗",長期慢性缺氧后"無效氧耗"降低,是缺氧時(shí)節(jié)約用氧的一種有效方式,提示可能為缺氧適應(yīng)的機(jī)制之一.2.缺氧暴露后在不改變線粒體內(nèi)膜上ANT密度的同時(shí),可顯著抑制ANT轉(zhuǎn)運(yùn)活性,從而降低能量產(chǎn)

3、生和利用的周轉(zhuǎn)率,這可能是缺氧時(shí)細(xì)胞能量代謝障礙的重要機(jī)制.3.ANT對大鼠腦線粒體氧化呼吸過程有較高的控制作用,可占整個(gè)呼吸環(huán)節(jié)的一半以上.缺氧雖可抑制ANT活性,但是并不降低其對氧化磷酸化的控制程度,提示線粒體氧化磷酸化功能障礙與ANT活性降低有關(guān),而與ANT對氧化磷酸化的控制程度無關(guān).4.缺氧暴露可使腦組織ANT1、ANT2mRNA表達(dá)量同時(shí)增加,而ANT2增長幅度大于ANT1,提示ANT2在缺氧代償及缺氧耐受方面較ANT1有更為