奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎病原的分離鑒定及血清學(xué)調(diào)查.pdf

1、奶山羊規(guī)?；B(yǎng)殖已成為我國(guó)奶山羊產(chǎn)業(yè)的主要發(fā)展方向，由于羊奶價(jià)格的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)，養(yǎng)殖奶山羊的地區(qū)也越來(lái)越多，如河南、黑龍江、福建、貴州等省份。在我國(guó)奶山羊主要養(yǎng)殖省份陜西和云南，規(guī)?；B(yǎng)殖已經(jīng)被養(yǎng)殖者普遍接受。但奶山羊傳染病至今仍是嚴(yán)重制約我國(guó)奶山羊產(chǎn)業(yè)規(guī)?；】蛋l(fā)展的主要因素之一，尤其是難以治愈的奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎(又名山羊偽結(jié)核病，Caseous lymphadenitis(CLA))?；疾∧躺窖虿粌H出現(xiàn)體重下降、生產(chǎn)性能差、繁殖功能

2、障礙等疾病癥狀。尤為嚴(yán)重的是，泌乳羊乳汁中含有一定數(shù)量的病原菌，從而對(duì)喜食生羊乳的消費(fèi)者健康造成巨大隱患。奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎在我國(guó)各地很多養(yǎng)殖場(chǎng)都可看到，但更為準(zhǔn)確地流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)仍是空白，這也是本研究要解決的主要問(wèn)題之一。
　　本研究選取陜西富、隴縣和云南瀘西的奶山羊養(yǎng)殖場(chǎng)，采集疑似山羊干酪性淋巴結(jié)炎病羊膿腫膿汁，采用細(xì)菌分離培養(yǎng)、顯微鏡觀察、生化試驗(yàn)、協(xié)同溶血試驗(yàn)、PCR、動(dòng)物致病性試驗(yàn)等方法對(duì)病原菌進(jìn)行分離鑒定;采用間接

3、ELISA對(duì)采集的奶山羊血清進(jìn)行CLA抗體測(cè)定。研究結(jié)果如下:
　　1.從陜西富平、隴縣和云南瀘西奶山羊羊群采集的樣品中共分離到3株菌株。分離菌株在普通瓊脂平板上生長(zhǎng)貧瘠，形成灰白色、圓形、較干燥小菌落;麥康凱瓊脂平板上不生長(zhǎng)。鮮血瓊脂平板上可見(jiàn)灰白色、不透明、同心圓狀、邊緣不齊、有狹窄β溶血環(huán)菌落，傳代后溶血現(xiàn)象消失。LB液體培養(yǎng)基中表面形成白色菌膜，管底有顆粒狀、絮狀沉淀。細(xì)菌鏡檢革蘭氏染色陽(yáng)性，無(wú)莢膜，無(wú)芽孢，不運(yùn)動(dòng)，多呈棒

4、狀或球桿狀。細(xì)菌生化特性與《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)》所述偽結(jié)核棒狀桿菌生化特性基本一致。
　　2.在綿羊鮮血平板上，分離菌株能與馬紅球菌呈現(xiàn)特征性協(xié)同溶血現(xiàn)象。
　　3.分子生物學(xué)檢測(cè)顯示3株菌株與GenBank中已收錄的偽結(jié)核棒狀桿菌參考株親緣關(guān)系97％以上。
　　4.Balb/c小鼠致病性試驗(yàn)和奶山羊回歸試驗(yàn)證實(shí)分離菌株具有很強(qiáng)的致病性。
　　5.陜西富平、隴縣和云南瀘西3個(gè)地區(qū)奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎血清抗體陽(yáng)性率為

5、59.92％。其中，富平、隴縣和瀘西奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎血清抗體陽(yáng)性率分別為:71.50％、67.50％和25.47％;半放牧半舍飼養(yǎng)殖、集約化養(yǎng)殖和合作社養(yǎng)殖下奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎血清抗體陽(yáng)性率分別為:25.47％、67.66％和75％。
　　6.經(jīng)兩樣本百分?jǐn)?shù)檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn):成年奶山羊比其他生理階段的山羊?qū)δ躺窖蚋衫倚粤馨徒Y(jié)炎更易感;與其他地區(qū)奶山羊相比，云南瀘西奶山羊?qū)ι窖蚋衫倚粤馨徒Y(jié)炎最不易感。在不同養(yǎng)殖模式下，合作社養(yǎng)殖奶山羊