三氧化二砷對激素非依賴性前列腺癌PC-3細(xì)胞系體外作用.pdf

1、10 4 5 90 6 2 1 4 0 0 5公 開文學(xué) 論 大 位 州 學(xué) 鄭 士碩(科 學(xué) 學(xué) 位 )三 氧 化 二 砷 對 激 素 非 依 賴 性 前 列 腺 癌PC一 3 細(xì) 胞 系 體 外 作 用院 系 名 稱 :學(xué) 科 門 類 :專 業(yè) 名 稱 :作 者 姓 名 :導(dǎo) 師 姓 名 、職 稱 :鄭 州 大 學(xué)第 一 附屬 醫(yī) 院醫(yī) 學(xué)月 中 瘤 學(xué)李 少 梅王 留興 教授二 零 零 九 年 五 月鄭州大學(xué) 2以 為 屆碩士學(xué)位

2、論文 (摘要 ) 三氧化二砷對激素非依賴性前列膝癌 P C 一 細(xì)胞 系體外作用材料 與方法 :1.選 用雄 激 素受 體 (A R ) 陰性 的人 前 列 腺癌 細(xì) 胞株 PC 一 3 常 規(guī)培 養(yǎng) ，生長至對 數(shù)期 時(shí) ，調(diào)整 Pc 一 3 細(xì)胞濃度 至 lx l護(hù) 個(gè)/m l ， 換含 As Z偽 的體積分?jǐn)?shù) 為 10% 胎牛血 清 的 R P M I1640 培養(yǎng) 基 ，調(diào)至 As Z偽 終濃 度 分別 為 1. 伽 m o功、

3、2.伽 m 。 切、4.伽 m 。 切、8.伽 m o功、10.伽 m o叭，連 續(xù) 培養(yǎng) 48 小 時(shí) 。以未加 藥 同期培 養(yǎng) 的 PC 一 3細(xì) 胞 作 陰性 對 照 。2. 在倒 置顯微鏡下觀 察 As Z仇 作用 于 PC 一 3 細(xì)胞 48h 后 的 PC 一 3 細(xì)胞 形態(tài)學(xué)變 化 。3. M TT 技術(shù)檢測 不 同濃度組 As Zo 3 作用 于 Pc 一 3 細(xì)胞 48 h 后對 Pc 一 3 細(xì)胞生 長 的影 響 。

4、4. 流 式 細(xì) 胞 術(shù) 檢 測 不 同濃 度 組 As ZO 3 作 用 于 P C 一 3 細(xì) 胞 48h 后 P C 一 3 細(xì)胞 周期 的變 化 。5. 采 用 免 疫 組化 方法 檢 測 不 同濃 度 組 As 20 3作 用 于 P C 一 3 細(xì) 胞 48h 后 P C 一 3細(xì) 胞 中 A R 蛋 白的表達(dá)情況 。6. 實(shí)驗(yàn) 數(shù) 據(jù) 經(jīng) SPSS13.0 統(tǒng) 計(jì) 軟件 處理 ，采 用 單 因素方 差 分析 ， 以 a=

5、0.05為差 異 顯 著 性 標(biāo) 準(zhǔn) 。結(jié) 果 :1. As ZO 3作 用 48h 后 P C 一 3 細(xì) 胞 形 態(tài) 學(xué) 變 化倒 置 顯 微 鏡 下觀 察 示 : 未加 藥 組 P C 一 3 細(xì) 胞 呈 梭 形 或 細(xì) 長 梭 形 ，貼 壁 生 長 ，胞 漿 均 勻透 明 ，折 光性好 ; 2.印 m o班 組 Pc 一 3 細(xì) 胞 貼壁 細(xì) 胞 開始 減 少 ，出現(xiàn) 脫 落細(xì)胞 ，部 分 細(xì) 胞 失去 了正常 的形 態(tài) ，開始

6、 變 圓 ，折 光 性 減 弱 ，胞 內(nèi) 出現(xiàn) 不均 勻顆粒 ; 4.伽 m o功 組 Pc 一 3 細(xì)胞 貼壁 細(xì)胞 大 量減 少 ，脫 落 細(xì) 胞增 多 ，細(xì)胞變 圓 ，胞 體開始 變 形 ，胞 內(nèi)顆 粒 增 多 ，折光 性差 ; 8.伽 m 。 功 組 PC 一 3 成 團(tuán)細(xì)胞 相互 分 離 ，大部 分 細(xì) 胞 脫 落 ，細(xì) 胞 呈 圓形 ，胞 體皺 縮 ，偶 見 細(xì) 胞 碎 片 。2. As 20 3作 用 48h 后 P C

7、一 3 細(xì) 胞 體 外 生 長 抑 制 作用M T T 法 檢 測 發(fā)現(xiàn) 各 濃 度 組 丸 20 3均 可 抑 制 PC 一 3 細(xì) 胞 的增 殖 ， 且 其 抑 制 增 殖作 用 具 有 劑 量 依 賴 性 (P < 0.00 1 )。流 式 細(xì) 胞 儀 檢 測 發(fā)現(xiàn) ，As ZO 3可 使 P C 一 3 細(xì) 胞 周 期 阻 滯 于 G 分 M 期 。0 、1、2 、如 m ol月As Z偽 作 用 48h 小 時(shí) 后 P