低強度脈沖超聲對新西蘭兔白細胞減少癥的影響研究.pdf

1、目前惡性腫瘤的發(fā)病率越來越高，放療和化療是其常見的治療方法之一，但這兩種方法在殺傷腫瘤細胞的同時對其他正常的組織器官亦有一定的損傷，因而可能導(dǎo)致一系列的不良反應(yīng)的發(fā)生，骨髓抑制是其常見的不良反應(yīng)。現(xiàn)有的抗腫瘤藥物大多具有不同程度的骨髓抑制，首先表現(xiàn)為白細胞總數(shù)(total white blood cells，WBC)減少和中性粒細胞減少，其次出現(xiàn)血小板(Platelets，PLT)減少和出血傾向，嚴重者可出現(xiàn)白細胞、紅細胞(red bl

2、ood cell，RBC)和PLT減少。
　　目前針對抗腫瘤治療引起的白細胞減少主要使用升白細胞藥物治療，其中最常見的是粒細胞集落刺激因子(Cranulocyte-colony stimu-lating factor，CSF)，雖然CSF可對大部分白細胞減少癥患者有效，但仍然有部分是無效的，還有一定的不良反應(yīng)，且費用昂貴。因此，需要尋找到更有效或/和副作用更小或/和便宜的治療方法。
　　近年來，低強度脈沖超聲（Low-Int

3、ensity Pulsed Ultrasound，IPUS）作為一種安全的物理治療方法，逐漸應(yīng)用到臨床的治療上，如促進骨與軟組織創(chuàng)傷的愈合。其發(fā)射方式為脈沖式，其劑量可低至30mw/cm2以下，操作簡便、安全有效且費用低廉。研究發(fā)現(xiàn)LIPUS可促進多種細胞的增殖，包括成纖維細胞、間充質(zhì)干細胞等。
　　我們前期研究已篩選出后續(xù)實驗的適宜LIPUS參數(shù)，并初步證實經(jīng)過LIPUS輻照后，正常骨髓有核細胞的增殖速度加快，細胞數(shù)目明顯增多。

4、而骨髓有核細胞的增殖與WBC的增加密切相關(guān)。因此本課題在其實驗的基礎(chǔ)上繼續(xù)深入研究，參考建立大鼠和小鼠白細胞減少癥模型的方法，采用環(huán)磷酰胺建立新西蘭兔白細胞減少癥模型，采用LIPUS對模型動物進行治療，觀察能否升高WBC，探討LIPUS用于治療白細胞減少癥的可能性。
　　目的：
　　1.測定新西蘭兔血常規(guī)的正常值，采用環(huán)磷酰胺建立新西蘭兔白細胞減少癥模型;
　　2.對比觀察使用CSF和短期（7天）使用LIPUS輻照后，

5、新西蘭兔的一般情況及其血常規(guī)的變化;
　　3.觀察較長時間（40天）使用LIPUS后，新西蘭兔的一般情況及其血常規(guī)的變化。
　　方法：
　　1.對150只新西蘭兔耳緣靜脈注射環(huán)磷酰胺，劑量為50mg/kg，連續(xù)注射4天。注射期間及注射后，于兔耳中動脈抽取0.5-1ml血液，進行血常規(guī)檢查。
　　2.將60只白細胞減少癥模型兔隨機分為三組，分別為LIPUS組、CSF組和對照組，每組20只。LIPUS組采用已篩選出的

6、適宜參數(shù)0.6W/cm2，20min進行輻照，連續(xù)輻照7天;CSF組則按5μg/kg的劑量于兔耳緣靜脈注射重組粒細胞刺激因子，連續(xù)7天;對照組則既不進行LIPUS輻照，也不進行CSF注射。
　　3.將60只白細胞減少癥模型兔隨機分為2組，LIPUS組和對照組，每組30只。LIPUS組連續(xù)輻照40天;對照組則不進行輻照。
　　結(jié)果：
　　1.注射環(huán)磷酰胺后新西蘭兔出現(xiàn)腹瀉等不良反應(yīng)，甚至出現(xiàn)死亡。在觀察期間，共有95只發(fā)

7、生腹瀉，腹瀉率為63.33％;30只死亡，死亡率為20％。WBC于注射環(huán)磷酰胺24小時后開始減少，至第4天降至低值（2.37±1.03×109/L），為給藥前WBC的20％;至22天時，仍處于較低水平（4.90±0.54×109/L），為給藥前WBC的42％，第4天和第22天的WBC與給藥前相比，WBC下降值均具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。
　　2.LIPUS組和CSF組的模型兔的腹瀉情況在處理后均開始好轉(zhuǎn)，LIPUS組的腹瀉和

8、死亡主要發(fā)生在開始輻照時，至第7天時已無腹瀉和死亡的發(fā)生，共有11只模型兔發(fā)生腹瀉，腹瀉率為55％;死亡2只，死亡率為10％。CSF組的腹瀉和死亡主要發(fā)生在停止使用CSF后，共有12只模型兔發(fā)生腹瀉，腹瀉率為60％;死亡5只，死亡率為25％。兩組間的腹瀉率和死亡率均無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。對照組的兔腹瀉未見好轉(zhuǎn)，共有17只模型兔發(fā)生腹瀉、死亡14只，腹瀉率為85％，死亡率為70％。LIPUS組的腹瀉率和死亡率與對照組相比，均低于對

9、照組，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05); CSF組與對照組相比，腹瀉率低于對照組，但無統(tǒng)計學(xué)意義;死亡率低于對照組，且有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　LIPUS組的WBC于第1天輻照后開始上升，于第8天（輻照7天后）輻照時達到高峰，停止輻照后下降，但仍維持在正常值范圍內(nèi)，至22天時仍在正常值范圍內(nèi);CSF組WBC于第一天注射CSF后開始上升，于第4天注射后達到高峰，第5天注射后開始下降，于第8天時降至正常值以下;對照組的WBC在

10、第5天開始升高，第8天升至正常值范圍內(nèi)，第14天后降至正常值以下。LIPUS組的WBC與CSF組相比，第2-17天時的WBC具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)，其中第2-5天時，LIPUS組的WBC低于CSF組，第8-17天時，LIPUS組的WBC高于CSF組;LIPUS組WBC與對照組相比，第2-14天時的WBC具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)，LIPUS組的WBC高于對照組;CSF組的WBC與對照組相比，第2-5天的WBC具有統(tǒng)計學(xué)意義(

11、p＜0.05)，CSF組的WBC高于對照組。
　　LIPUS組的PLT于第1天輻照后升至正常值以上，停止輻照后降至正常值范圍內(nèi)，CSF組的PLT于第1天注射后升高，但隨即下降，第5天注射時已降至正常值范圍內(nèi)，對照組的PLT一直在正常值范圍內(nèi)波動。雖然LIPUS組PLT高于CSF組和對照組，但3組間均無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　LIPUS組、CSF組和對照組的RBC和HGB均持續(xù)下降，LIPUS組與CSF組相比，LIPUS組與對照組相

12、比， CSF組與對照組，三組的RBC和HGB均無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3.延長LIPUS的輻照天數(shù)，LIPUS組的WBC于輻照1天后即開始上升，于輻照7天后達到高峰，隨后降至正常值范圍內(nèi)，至40天時仍在正常值范圍內(nèi)。第4-27天時，LIPUS組與對照組相比， LIPUS組的WBC高于對照組，且具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　LIPUS組模型兔于第4天時已無腹瀉發(fā)生，共腹瀉6只，未出現(xiàn)死亡，腹瀉率為20％，死亡率為0％。而對