家兔燒傷早期痂下水腫液中白蛋白的吸收現(xiàn)象及藥代動(dòng)力學(xué)觀察.pdf

1、正常機(jī)體受到熱力損傷后血管通透性增高，導(dǎo)致燒傷早期體液滲入第三間隙并潴留在其中，引起第三間隙異常。這部分體液中白蛋白含量較大，是造成血漿蛋白濃度下降，導(dǎo)致血漿膠體滲透壓（colloid osmotic pressure，COP）急劇下降和組織液COP升高的重要因素之一，同時(shí)也加強(qiáng)了燒傷后水腫的形成，且進(jìn)一步引發(fā)燒傷后機(jī)體的各種生理病理變化。
　　 痂下水腫液（subeschar tissue fluid，STF）的聚集是燒傷局部

2、第三間隙異常的典型表現(xiàn)之一，其間蛋白含量與血清含量相近，約為血漿蛋白量的80％，以白蛋白為主。那么，滲入痂下水腫液中的白蛋白是否一定處于靜止不動(dòng)的滯留狀態(tài)？或否如同小分子物質(zhì)那樣能夠滲出與吸收同時(shí)共存？若存在回吸收，那么回吸收的速度與量怎樣？以及回吸收后的白蛋白是否依然可以發(fā)揮相應(yīng)生理功能？這些問(wèn)題需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)的方法來(lái)回答。
　　 本研究為了揭示燒傷后痂下水腫液白蛋白的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，通過(guò)建立家兔局部皮膚深度燒傷模型并在其痂下組織

3、注射“示蹤”用人白蛋白，以便模擬傷后痂下水腫液白蛋白的滲出，連續(xù)檢測(cè)兔血液中示蹤白蛋白的濃度，觀察傷后早期示蹤白蛋白含量動(dòng)態(tài)變化，同時(shí)分析其藥代動(dòng)力學(xué)變化，從而部分揭示其分布規(guī)律，為今后臨床上我們趨利避害，探討減少蛋白外滲或促進(jìn)其重吸收的方法打下理論基礎(chǔ)。因此，研究白蛋白等大分子在燒傷痂下水腫液中的分布規(guī)律對(duì)于燒傷病人的臨床救治具有重要的參考作用。研究目的研究通過(guò)建立家兔局部皮膚深度燒傷模型并在其痂下注射人白蛋白作為示蹤，檢測(cè)血液中示蹤

4、白蛋白濃度，以觀察燒傷早期白蛋白動(dòng)態(tài)，同時(shí)分析標(biāo)本中示蹤白蛋白的藥代動(dòng)力學(xué)變化，從而推測(cè)燒傷后痂下水腫液等第三間隙中大分子物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)及分布規(guī)律。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：
　　 1、家兔8％ TBSA Ⅲ度燒傷早期痂下水腫液中白蛋白的吸收現(xiàn)象及藥代動(dòng)力學(xué)觀察34只成年雄性新西蘭兔，體質(zhì)量（2.8±0.3）kg，按隨機(jī)數(shù)字表法將家兔分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組17只。家兔飼養(yǎng)1周，背部備皮（先剪毛，后使用硫化鈉脫毛），按45mg/kg

5、由家兔耳靜脈緩慢注入10％戊巴比妥鈉溶液麻醉后，實(shí)驗(yàn)組使用電燙傷儀100℃燙傷家兔背部15s，制成約8％TBSA Ⅲ度燙傷（經(jīng)病理切片證實(shí)）模型。隨即在痂下注射人白蛋白溶液5ml（含1g人白蛋白）作為示蹤。家兔自由飲水。于傷后2、4、8、16、24、48、72h分別在家兔后肢脛靜脈剪毛抽取血液標(biāo)本1.5ml；對(duì)照組家兔除不予燙傷外，其余處理措施同實(shí)驗(yàn)組。標(biāo)本靜置2h后，2100r/min離心15min取上清液，采用雙抗體夾心法（一抗為兔

6、抗人白蛋白血清抗體、二抗為羊抗兔IgG抗體）檢測(cè)示蹤白蛋白濃度，另使用生化分析儀（意大利LOGOTECH公司）檢測(cè)家兔血清白蛋白。使用3P97實(shí)用藥代動(dòng)力學(xué)計(jì)算程序處理藥物濃度數(shù)據(jù)，擬合藥代動(dòng)力學(xué)模型并計(jì)算其相關(guān)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　 2、家兔40％ TBSA Ⅲ度燒傷早期痂下水腫液中白蛋白的吸收現(xiàn)象及藥代動(dòng)力學(xué)觀察40只成年雄性新西蘭兔，體質(zhì)量（2.8±0.3）kg，按隨機(jī)數(shù)字表法將家兔分成

7、實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組20只。家兔飼養(yǎng)1周，背部備皮（先剪毛，后使用硫化鈉脫毛），按45mg/kg由家兔耳靜脈緩慢注入10％戊巴比妥鈉溶液麻醉后，使用電燙傷儀100℃燙傷家兔背部15s，制成約40％ TBSA Ⅲ度燙傷（經(jīng)病理切片證實(shí)）模型。隨即在痂下注射人白蛋白溶液5ml（含1g人白蛋白）作為示蹤。家兔自由飲水。于傷后2、4、8、16、24、48、72、96、128h分別在家兔后肢脛靜脈剪毛抽取血液標(biāo)本1.5ml；對(duì)照組家兔除不予燙傷外

8、，其余處理措施同實(shí)驗(yàn)組。標(biāo)本靜置2h后，2100r/min離心15min取上清液，采用雙抗體夾心法（一抗為兔抗人白蛋白血清抗體、二抗為羊抗兔IgG抗體）檢測(cè)示蹤白蛋白濃度，使用生化分析儀（意大利LOGOTECH公司）檢測(cè)家兔血清白蛋白。使用3P97實(shí)用藥代動(dòng)力學(xué)計(jì)算程序處理藥物濃度數(shù)據(jù),擬合藥代動(dòng)力學(xué)模型并計(jì)算其相關(guān)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　 1、對(duì)照組注射示蹤白蛋白后，

9、出現(xiàn)一個(gè)較小的吸收峰，以8-48小時(shí)為明顯，16h該白蛋白濃度達(dá)峰值，但示蹤白蛋白總的吸收量（用曲線下面積表示）與兔白蛋白含量比值約為10-3。
　　 2、家兔被制成8％ TBSA Ⅲ度燙傷后，實(shí)驗(yàn)組家兔傷后8h示蹤白蛋白濃度為(421±10)μg/L，達(dá)峰值；藥代動(dòng)力學(xué)分析結(jié)果顯示以二房室模型為最佳（權(quán)重W＝1/C2）。實(shí)驗(yàn)組示蹤白蛋白分布相半衰期（t1/2α）為4.0271h，明顯短于對(duì)照組t1/2α（12.0907h）；實(shí)

10、驗(yàn)組AUC為22336.38μg·h/ml，明顯大于對(duì)照組（5827.77μg·h/ml）。
　　 3、家兔被制成40％ TBSA Ⅲ度燙傷后，實(shí)驗(yàn)組家兔傷后24h示蹤白蛋白濃度為(423±27) μg/L，達(dá)峰值；藥代動(dòng)力學(xué)分析結(jié)果顯示以二房室模型為最佳（權(quán)重W＝1/C2）。實(shí)驗(yàn)組示蹤白蛋白分布相半衰期（t1/2α）為1.7326h，明顯短于對(duì)照組t1/2α（8.8182h），同時(shí)也明顯短于8％ TBSA Ⅲ度燙傷組t1/2α

11、（4.0271h）；實(shí)驗(yàn)組AUC為88814.84μg·h/ml，明顯大于對(duì)照組（13738.47μg·h/ml），同時(shí)也明顯大于8％ TBSA Ⅲ度燙傷組（22336.38μg·h/ml）。
　　 結(jié)論：
　　 研究結(jié)果表明：
　　 一、大分子物質(zhì)如白蛋白在正常情況下亦存在皮下組織的吸收現(xiàn)象，但其吸收速度和吸收的數(shù)量均較小，吸收的白蛋白量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不足以影響血漿白蛋白含量（兩者相差103倍）。
　　 二、在家