SARS肺纖維化病理特點(diǎn)和機(jī)制研究.pdf

1、目的和意義：SARS截至2003年8月7日，全球累計(jì)發(fā)病8422例，平均病死率達(dá)到9.3％，其急性期的傳染性、暴發(fā)性、聚集性，使世人為之震驚，晚后期并發(fā)肺纖維化，重者導(dǎo)致患者死亡，輕者危害健康和生存質(zhì)量，均成為醫(yī)學(xué)工作者面臨的重大研究課題。本研究以SARS死亡患者和獼猴模型肺標(biāo)本為對(duì)象，在器官、組織、細(xì)胞、亞細(xì)胞及分子水平上，探討肺纖維化的發(fā)生發(fā)展病理過(guò)程、病變特點(diǎn)及其發(fā)生機(jī)制，為其防治提供病理學(xué)依據(jù)和新思路。 材料與方法：以6

2、例SARS死亡患者(分別于發(fā)病后9、14、20、29、33、38d死亡)和6只獼猴實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?分別于染毒后7、12、14、14、32、35d活殺取材)肺標(biāo)本為對(duì)象，應(yīng)用H.E染色、三聯(lián)染色、苦味酸-天狼猩紅-偏振光法、電鏡和圖像分析等技術(shù)，對(duì)比性觀察SARS肺組織病理變化和纖維化的病理過(guò)程、膠原纖維、網(wǎng)狀纖維和彈力纖維的變化特點(diǎn)、Ⅰ型與Ⅲ型膠原纖維的數(shù)量和分布規(guī)律，旨在探討SARS肺纖維化的病變經(jīng)歷過(guò)程及特點(diǎn)；利用免疫組織化學(xué)(SP法)和

3、形態(tài)計(jì)量學(xué)技術(shù)檢測(cè)SARS死亡患者肺臟的Vimentin、TGFβ1、TNFα、IL-1β和MMP-2等與炎癥反應(yīng)和纖維化相關(guān)活性因子，探討其發(fā)病機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.6例不同時(shí)間死亡者肺臟呈現(xiàn)明顯不同的基本病變：9和14d死亡例表現(xiàn)為彌漫性肺水腫伴透明膜形成，20和29d死亡例表現(xiàn)為肺泡上皮壞死脫落伴增生和機(jī)化，33和38d死亡例表現(xiàn)為纖維增生伴早期纖維化；2.肺成纖維細(xì)胞和間質(zhì)纖維組織發(fā)生進(jìn)行性增生性變化，表現(xiàn)為四種類(lèi)型：成

4、纖維細(xì)胞輕度活躍型(見(jiàn)于9、14d)、成纖維細(xì)胞增生型(見(jiàn)于20d)、纖維增生型(見(jiàn)于29d)、纖維化形成型(見(jiàn)于33、38d)，提示SARS肺組織纖維化可能經(jīng)歷四個(gè)階段；3.經(jīng)三聯(lián)染色和天狼猩紅染色證實(shí)，纖維增生以膠原纖維為主，網(wǎng)狀纖維和彈力纖維變化較輕，Ⅰ型膠原增生較Ⅲ型膠原明顯。4.在機(jī)制研究方面，(1)波形蛋白表達(dá)增強(qiáng)，并隨時(shí)間延長(zhǎng)，持續(xù)性增加，其中20-38d具有顯著或非常顯著差異(p＜0.05，p＜0.01)，具有時(shí)相性特點(diǎn)

5、，即于SARS發(fā)病后隨時(shí)間延長(zhǎng)，波形蛋白表達(dá)呈現(xiàn)逐漸增強(qiáng)的過(guò)程，與肺纖維化病變經(jīng)歷四個(gè)階段相一致。(2)TGF-β1表達(dá)早期輕微增強(qiáng)，29-38d顯著增加，具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05，p＜0.01)。(3)IL-1β和TNF-α表達(dá)于9d均明顯增強(qiáng)，14d達(dá)到高峰，呈極強(qiáng)陽(yáng)性，具有顯著差異(p＜0.05)，20-38d漸減弱，然均高于對(duì)照組。(4)MMP-2于9-38d均不同程度高于對(duì)照組，其中20d和33d具有顯著差異(p＜0.05)

6、，表明SARS纖維化形成階段MMP-2仍有活性，繼續(xù)降解膠原。提示多種炎癥反應(yīng)和纖維化相關(guān)因子參與SARS肺纖維化的形成。5.SARS獼猴模型的肺臟發(fā)生類(lèi)似人體病變，7d出現(xiàn)輕度間質(zhì)性肺炎變化，12-14d上述病變略加重，33-35d進(jìn)一步加重，發(fā)生成纖維細(xì)胞增生和輕度小灶狀纖維化。特殊染色證實(shí)，也以膠原纖維增生為主，其中Ⅰ型膠原增生顯著，波形蛋白表達(dá)較對(duì)照組呈增強(qiáng)趨勢(shì)，然未見(jiàn)顯著性差異(p＞0.05)。上述病變較同期人體肺病變輕微、滯

7、后。 結(jié)論：1.SARS發(fā)病后于9-38d死亡的6例患者肺臟出現(xiàn)程度不等的成纖維細(xì)胞和纖維組織增生，其中2例(33、38d)發(fā)生典型的肺纖維化病變。2.SARS肺纖維化病變發(fā)生發(fā)展經(jīng)歷四階段，即：成纖維細(xì)胞輕度活躍期(9-14d)、成纖維細(xì)胞增生期(20d)、纖維增生期(29d)和纖維化形成期(33-38d)。3.SARS肺纖維化病變特點(diǎn)為：(1)出現(xiàn)較早(33d)；(2)呈進(jìn)行性發(fā)展；(3)以Ⅰ型膠原纖維為主；(4)局灶性分布