版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究蕨麻正丁醇部位對(duì)大鼠結(jié)扎冠狀動(dòng)脈所致急性心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其蛋白表達(dá)差異的影響,進(jìn)而探討蕨麻正丁醇部位心肌保護(hù)作用的藥理機(jī)制。
方法:選取雄性SD大鼠隨機(jī)分為手術(shù)對(duì)照組,模型組,蕨麻正丁醇部位49.3mg.kg-1,98.6mg·kg-1,197.2m g·kg-1干預(yù)組,復(fù)方丹參328.6mg·kg-1干預(yù)組。手術(shù)對(duì)照組給予3‰羧甲基纖維素(CMC),連續(xù)灌胃14天,通過(guò)結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支建立
2、急性心肌缺血再灌注模型。測(cè)定各處理組動(dòng)物心電圖的變化;取心肌組織進(jìn)行常規(guī)HE染色;取血清檢測(cè)LDH、CK、SOD活性及MDA含量;透射電鏡檢測(cè)急性心肌缺血再灌注損傷以后心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化;提取各組心肌組織蛋白,經(jīng)雙向電泳和銀染得到雙向電泳圖譜,用PDOuest7.0軟件進(jìn)行圖像分析;考馬斯亮藍(lán)染色后,取蛋白點(diǎn)進(jìn)行酶解,再用MALDI-TOF-MS進(jìn)行分析,使用Mascot軟件在NCBInr數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行搜索,鑒定差異蛋白質(zhì)的種類并采用
3、western blot方法進(jìn)一步驗(yàn)證。
結(jié)果:
1.蕨麻正丁醇部位對(duì)大鼠急性心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用:(1)各組心電圖ST段變化:模型組心電圖ST段發(fā)生明顯偏移。與模型組相比,中高劑量蕨麻正丁醇部位給藥組和復(fù)方丹參藥物組心電圖ST段變化幅度明顯降低。(2)HE染色:模型組組織病理學(xué)改變顯著,心肌間質(zhì)出現(xiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn),心肌纖維嗜酸性變,肌節(jié)斷裂,壞死;蕨麻高、中劑量組心肌損傷程度較模型組減輕,低劑量組與模型
4、組比較未見明顯改善。(3)心肌超微結(jié)構(gòu)的變化:電鏡結(jié)果顯示蕨麻正丁醇高劑量組能夠減輕心肌細(xì)胞缺血再灌注損傷導(dǎo)致的線粒體腫脹、空泡化,核周間隙擴(kuò)增等超微結(jié)構(gòu)的損傷改變,維持相對(duì)整齊的心肌纖維排列。(4)血清LDH、CK檢測(cè):與模型組相比,給予中高劑量蕨麻正丁醇部位均可顯著降低缺血再灌注大鼠血清LDH活性(P<0.01)和CK活性(P<0.01);(5)血清MDA、SOD檢測(cè):與模型組相比,各濃度蕨麻正丁醇部位均可顯著提高缺血再灌注大鼠血清
5、中SOD活力(P<0.01),減少M(fèi)DA的產(chǎn)生(P<0.01、),且呈現(xiàn)一定的濃度依賴性。
2.大鼠心肌組織蛋白雙向電泳圖譜分析
經(jīng)PDquest軟件分析檢測(cè)到的各組總蛋白點(diǎn)數(shù):對(duì)照組1003±23,丹參組918±65,低劑量組877±72,中劑量組1046±43,高劑量組891±23,模型組738±69。分離的蛋白點(diǎn)多分布于P14.8-9.0、MW30kDa-70kDa的范圍。模型組與手術(shù)對(duì)照組比較(P<0
6、.05),其中分析后表達(dá)升高的有5個(gè)點(diǎn),降低的有39個(gè)點(diǎn),45個(gè)點(diǎn)未見表達(dá)。在表達(dá)升高的5個(gè)點(diǎn)中有1個(gè)點(diǎn)被蕨麻正丁醇部位高,中劑量組及復(fù)方丹參組下調(diào)。在模型組未見表達(dá)的45個(gè)點(diǎn)中,能被三個(gè)劑量組共同上調(diào)的有6個(gè)點(diǎn),復(fù)方丹參組有3個(gè)點(diǎn)與蕨麻正丁醇部位相同。在表達(dá)降低的39個(gè)點(diǎn)中,能被三個(gè)劑量組及復(fù)方丹參組共同上調(diào)的有4個(gè)點(diǎn)。
3.差異蛋白質(zhì)的質(zhì)譜鑒定
對(duì)取得的7個(gè)差異蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TOF質(zhì)譜鑒定,得分
7、均大于61分(P<0.05),可以確認(rèn)蛋白質(zhì)種類。分別為αB晶體蛋白(alpha B-crystallin)、磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白(phosphatidylethanolamine binding protein,PEBP)、輔酶Q10(NADH dehydrogenase1 alpha10)、載脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)、肌球蛋白輕鏈3(myosin,light chain3)、肌球蛋白輕鏈2(Myosin
8、 regulatory light chain2),αB晶體蛋白CRA b亞基(crystallin.alpha B,isoform CRA b)
4.Western blot驗(yàn)證
Western blot實(shí)驗(yàn)顯示,輔酶Q10在心肌細(xì)胞中存在表達(dá),且該蛋白在心肌缺血再灌注損傷后以及藥物干預(yù)后表達(dá)的變化趨勢(shì)與雙向電泳圖像經(jīng)PDQuest軟件分析后得到的蛋白質(zhì)變化趨勢(shì)相一致。
結(jié)論:
9、1.蕨麻正丁醇部位能夠改善急性心肌缺血再灌注所致的心肌組織形態(tài)的病理改變,保護(hù)心肌組織的超微結(jié)構(gòu),其作用與其清除自由基的能力有關(guān)。
2.心肌缺血再灌注損傷可引起心肌蛋白質(zhì)表達(dá)變化,其中部分差異蛋白可被藥物干預(yù)向?qū)φ战M的方向調(diào)節(jié),提示組織中出現(xiàn)的差異蛋白質(zhì)中部分可能為心肌損傷誘導(dǎo)的基因表達(dá)產(chǎn)物及藥物作用靶點(diǎn)。
3.經(jīng)過(guò)驗(yàn)證,蕨麻正丁醇部位能通過(guò)上調(diào)輔酶Q10蛋白,減少自由基的產(chǎn)生,減輕膜脂質(zhì)過(guò)氧化保護(hù)損傷,從而
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 蕨麻正丁醇部位抑制缺血再灌注大鼠心肌細(xì)胞凋亡的研究.pdf
- 蕨麻對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其血清差異蛋白表達(dá)的初步研究.pdf
- 環(huán)孢素A對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf
- HXAX對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf
- 姜黃素對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf
- 蕨麻正丁醇部位對(duì)心肌細(xì)胞缺氧損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf
- 辛夷脂素對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf
- 丹曲林對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf
- 褪黑素對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf
- 載脂蛋白A-I對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf
- 蘆丁對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf
- 莪達(dá)夏對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用研究.pdf
- 蕨麻有效部位對(duì)小鼠急性心肌缺血損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究
- 澤瀉湯不同部位對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷心功能的保護(hù)作用研究.pdf
- 天香丹對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用研究.pdf
- 大鼠缺血—再灌注損傷心肌中Hsc70相互作用蛋白組學(xué)及其心肌保護(hù)作用研究.pdf
- 心肌缺血預(yù)處理和后處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf
- 蕨麻有效部位對(duì)小鼠急性心肌缺血損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf
- 巴戟天對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的防護(hù)作用.pdf
- 菠蘿蛋白酶預(yù)處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論