Livin和Bcl-2蛋白在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的：細(xì)胞凋亡是體內(nèi)清除衰老、退化和受損細(xì)胞的一個(gè)重要途徑，細(xì)胞凋亡與增殖的動(dòng)態(tài)平衡在維持多細(xì)胞動(dòng)物的生長發(fā)育和正常組織器官的結(jié)構(gòu)與功能中起著重要作用。一旦凋亡過程受到抑制，使基因發(fā)生突變的細(xì)胞得以生存和增殖，最終會(huì)導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。細(xì)胞凋亡與癌變的關(guān)系引起人們的廣泛關(guān)注，成為目前分子細(xì)胞生物學(xué)的一個(gè)新的研究熱點(diǎn)。Livin（ML-IAP/KIAP）是IAP（inhibitor of apoptosis protein）家族的新成員，是重

2、要的細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)因子，其組織分布具有明顯的細(xì)胞選擇性，特異性表達(dá)于人的胚胎組織以及大多數(shù)人類實(shí)體瘤細(xì)胞。隨著研究的深入，Livin在IAP家族中抑制細(xì)胞凋亡、誘導(dǎo)細(xì)胞增殖的作用愈來愈發(fā)引起人們的關(guān)注和重視。Bcl-2（B-cell lymphoma/leukemia-2）基因是從濾泡性淋巴瘤細(xì)胞中分離出來的一種癌基因，為細(xì)胞凋亡或程序性死亡過程的拮抗基因。 Bcl-2在多種正常組織如：骨髓、表皮、淋巴組織及各種腺體廣泛表達(dá)。在多種人體腫

3、瘤中也檢測到Bcl-2表達(dá)，并與腫瘤的分化、抗藥性、預(yù)后等有關(guān)。本研究旨在通過采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測Livin和Bcl-2在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)情況，來探討Livin與Bcl-2在食管鱗狀細(xì)胞癌發(fā)展過程中的表達(dá)規(guī)律及其相關(guān)性，為食管癌的臨床治療研究提供科學(xué)的理論依據(jù)。
　　 方法：采用流式細(xì)胞分析技術(shù)對(duì)食管鱗狀細(xì)胞癌患者的癌組織進(jìn)行Livin和Bcl-2的計(jì)量分析。腫瘤組織及遠(yuǎn)癌組織標(biāo)本取自河北醫(yī)大第四醫(yī)院胸外科2008年5月～

4、2008年8月行根治手術(shù)的食管鱗狀細(xì)胞癌患者標(biāo)本50例，其中男性32例，女性18例，年齡43～72歲，根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟（UICC）食管鱗狀細(xì)胞癌國際TNM分期標(biāo)準(zhǔn)：T18例，T210例，T332例，N027例，N123例。以同期50例食管遠(yuǎn)癌組織作為對(duì)照。用組織剪取新鮮標(biāo)本約0.5cm×0.5cm×0.5cm大小的組織塊1-2塊，用75％酒精固定，依次進(jìn)行過濾、離心、標(biāo)抗等步驟，最后用流式細(xì)胞儀對(duì)標(biāo)抗好的單細(xì)胞懸液組織進(jìn)行流式分析，以P

5、BS液作為陰性對(duì)照，只加二抗（FITC）作為陽性對(duì)照，檢測結(jié)果以平均熒光強(qiáng)度（x±S）表示。用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，包括t檢驗(yàn)、方差分析、Pearson相關(guān)分析等。
　　 結(jié)果：
　　 1.Livin在不同組織中的表達(dá)情況：Livin在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中的平均熒光強(qiáng)度為197.87±50.13，在癌旁組織中的平均熒光強(qiáng)度為78.56±39.81，兩組相比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性（P<0.05）。

6、r>　　 2.Bcl-2在不同組織中的表達(dá)情況：Bcl-2在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中的平均熒光強(qiáng)度為322.93±54.77，在癌旁組織中的平均熒光強(qiáng)度為164.49±47.46，在癌組織和癌旁組織之間存在顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性（P<0.05）。
　　 3.Livin和Bcl-2在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系：食管鱗狀細(xì)胞癌患者的年齡、性別、腫瘤的組織分型與Livin及Bcl-2表達(dá)無關(guān)；Livin及 Bcl-2在食

7、管鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及癌組織浸潤深度之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。
　　 4.Livin和Bcl-2與食管鱗狀細(xì)胞癌國際 TNM分期（UICC）的關(guān)系：食管鱗狀細(xì)胞癌中Livin在Ⅰ期的平均熒光強(qiáng)度為108.93±18.07，在Ⅱa期的平均熒光強(qiáng)度為160.96±36.70，在Ⅱ b期的平均熒光強(qiáng)度為194.31±32.03，在Ⅲ期的平均熒光強(qiáng)度為241.91±22.58，各期之間存在顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性（P<

8、0.05）；Bcl-2在Ⅰ期的平均熒光強(qiáng)度為227.13±21.34，在Ⅱa期的平均熒光強(qiáng)度為271.97±23.93，在Ⅱ b期的平均熒光強(qiáng)度為322.63±36.25，在Ⅲ期的平均熒光強(qiáng)度為369.37±23.37，各期之間存在顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性（P<0.05）。
　　 5.Livin和Bcl-2之間的相互關(guān)系：癌組織中，Livin的平均熒光強(qiáng)度表達(dá)為197.87±50.13，Bcl-2的平均熒光強(qiáng)度表達(dá)為322.93±54

9、.77，相關(guān)檢驗(yàn)其相關(guān)系數(shù)r=0.856，P<0.01；癌旁組織中，Livin的平均熒光強(qiáng)度表達(dá)為78.56±39.81，Bcl-2的平均熒光強(qiáng)度表達(dá)為164.49±47.46，相關(guān)檢驗(yàn)其相關(guān)系數(shù)r=0.081，P>0.05。
　　 結(jié)論：
　　 1. Livin和Bcl-2在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中的含量表達(dá)明顯高于它們?cè)谑彻馨┡越M織中的含量表達(dá)。
　　 2. Livin.及Bcl-2在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)與

10、患者的年齡、性別、腫瘤的分化程度無關(guān)。Livin蛋白及Bcl-2蛋白在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及癌組織浸潤深度有關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織與浸潤程度較深的癌組織Livin蛋白與Bcl-2蛋白的表達(dá)較高。
　　 3. Livin及Bcl-2在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)與食管鱗狀細(xì)胞癌TNM分期有關(guān)，隨著分期的增加Livin及Bcl-2的表達(dá)逐漸增高。
　　 4.在食管鱗狀細(xì)胞癌組織中，Livin和Bcl-2兩種