水稻維管束鞘細(xì)胞葉綠體積累突變體的篩選及鑒定.pdf

1、水稻是世界三大糧食作物之一，也是亞洲最重要的糧食作物，水稻高光效育種研究已經(jīng)成為了世界許多研究機(jī)構(gòu)的重要課題。傳統(tǒng)的育種方法已經(jīng)很難使水稻的增產(chǎn)達(dá)到理想的效果，隨著基因組學(xué)的發(fā)展，人們把方向轉(zhuǎn)到轉(zhuǎn)C4基因水稻的創(chuàng)制中。但是，轉(zhuǎn)C4水稻也表現(xiàn)出其局限性。大量的證據(jù)已經(jīng)表明，許多C3植物中存在C4途徑，從C3植物中篩選類C4結(jié)構(gòu)的突變類型是一種比較合理的方法。
　　本實(shí)驗(yàn)從水稻T-DNA激活標(biāo)簽插入突變體庫中進(jìn)行維管束鞘細(xì)胞葉綠體積累

2、突變體的大規(guī)模篩選，并對(duì)突變體進(jìn)行了生物學(xué)基礎(chǔ)分析以及T-DNA插入位點(diǎn)的初步功能預(yù)測(cè)。主要結(jié)果如下:
　　(1)從8600份水稻激活標(biāo)簽系中篩選出10份維管束鞘細(xì)胞葉綠體積累突變體株系，并在其中2份突變株中還發(fā)現(xiàn)了窄時(shí)(A263-4)、卷葉(A5382-1)的表型;
　　(2)突變體生理指標(biāo)分析:農(nóng)藝性狀統(tǒng)計(jì)表明，突變體產(chǎn)量下降，株高降低，結(jié)實(shí)率下降;在苗期，突變體葉綠素含量高于野生型，至分蘗期和成熟期，差距逐漸減小;野生

3、型的光合速率、氣孔導(dǎo)度、蒸騰速率明顯高于突變體，胞間CO2濃度值較低，突變體的總體生長狀況弱于野生型;光響應(yīng)曲線表明，突變體的光飽和點(diǎn)高于野生型，呼吸作用弱于野生型。PEPCase和RuBPase活性測(cè)定表明，突變體的PEPCase活性普遍升高，而RuBPase活性降低。葉片可溶性蛋白含量有所降低。
　?。?)利用Tail-PCR對(duì)10份突變體進(jìn)行側(cè)翼序列的獲取，初步得到三個(gè)有效T-DNA插入位點(diǎn)，并在插入位點(diǎn)12000bp的范圍