未成年雌性大鼠亞慢性染鎘卵巢生長(zhǎng)發(fā)育及FSHR的表達(dá).pdf

1、目的:
　　通過研究鎘暴露對(duì)未成年雌性大鼠卵巢生長(zhǎng)發(fā)育及FSHR表達(dá)的影響,為鎘生殖毒性及其機(jī)制的進(jìn)一步研究提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:
　　未成年雌性Wistar大鼠(21日齡)48只按體重隨機(jī)分為4組,每組12只,染毒劑量(以CdCl2計(jì))分別為0.5、2.0、8.0(㎎/㎏)和對(duì)照組(僅給予蒸餾水),每日灌胃染毒一次(按10ml/kg等容量給藥),每周6天,持續(xù)5周。染毒第5周開始每天2次用陰道脫落細(xì)胞涂片法連續(xù)觀

2、察并記錄動(dòng)情周期。于動(dòng)情前期處死大鼠,觀察指標(biāo)包括:動(dòng)情周期、體重、卵巢臟器系數(shù)、血清雌、孕激素,卵巢各級(jí)卵泡數(shù)、卵巢顆粒細(xì)胞體外培養(yǎng)液中雌激素(Estradiol,E2)和孕激素(Progesterone,P)水平。進(jìn)一步應(yīng)用免疫組織化學(xué)法測(cè)定卵巢卵泡刺激素受體(FollicleStimulatinghormonereceptor,FSHR)表達(dá),并采用Western-blot和熒光定量PCR法分別測(cè)定卵巢顆粒細(xì)胞的FSHR蛋白和mR

3、NA的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、與對(duì)照組相比,8mg/kg組動(dòng)情間期明顯延長(zhǎng)而動(dòng)情期明顯縮短(P<0.05)。
　　2、各染毒劑量組的卵巢重量和臟器系數(shù)與對(duì)照組相比,未出現(xiàn)明顯差異(P>0.05)。
　　3、與對(duì)照組相比,8mg/kg組閉鎖卵泡的構(gòu)成比顯著升高而生長(zhǎng)卵泡顯著下降(P<0.05)。
　　4、與對(duì)照組比較,各染毒組血清中E2、P未出現(xiàn)明顯變化(P>0.05)。
　　5、各染毒組顆粒細(xì)胞培

4、養(yǎng)液中E2、P水平均明顯降低,與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　6、應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察卵巢FSHR表達(dá),與對(duì)照組相比,各染毒組卵巢FSHR表達(dá)均明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　7、應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡法觀察FSHR蛋白的相對(duì)表達(dá)量,2mg/kg、8mg/kg組FSHR蛋白表達(dá)均低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　8、應(yīng)用熒光定量PCR法觀察FshrmRNA的相

5、對(duì)表達(dá)量,各染毒劑量組FSHRmRNA表達(dá)均低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　根據(jù)以上結(jié)果,可得出如下結(jié)論:
　　1.未成年雌性大鼠亞慢性鎘暴露后卵巢生長(zhǎng)發(fā)育受到明顯損害,可以表現(xiàn)為動(dòng)情前期明顯縮短、動(dòng)情間期延長(zhǎng)及動(dòng)情周期異常發(fā)生率明顯上升、卵泡發(fā)育障礙、卵巢顆粒細(xì)胞類固醇激素分泌功能異常等。
　　2.鎘對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞FSHR的基因和蛋白表達(dá)具有明顯的抑制作用,從而可能影響下丘腦—