實驗性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎大鼠血腦屏障功能和粘附分子表達(dá)的動態(tài)變化及關(guān)系研究.pdf

1、該實驗探討EAE時BBB功能及ICAM-1表達(dá)的動態(tài)變化及其相互關(guān)系,以求進(jìn)一步揭示EAE發(fā)病機理.應(yīng)用GPCSH與CFA皮下注射及減毒百日咳桿菌皮內(nèi)注射成功誘導(dǎo)了Wistar大鼠高發(fā)病率(83.3％;n=24)EAE模型.檢測p.i.第4天、6天、8天、10天、12天、14天、16天、18天、20天血清和CSF中ALB含量,其CSF/S ALB比值(QA)作為評價BBB損害的指標(biāo);同時段取動物腦、脊髓、胸腺和腹股溝淋巴結(jié)制成石蠟切片行

2、HE染色和ICAM-1半定量免疫組化分析,結(jié)果顯示如下:1、EAE大鼠p.i.4-8天無任何臨床表現(xiàn);p.i.10天癥狀開始明顯,癥狀評分為2.33±0.76(n=6);p.i.12-14天為發(fā)病高峰期,癥狀評分為3.75士0.54(n=12),病情由最初的活動減少,體重減輕逐漸發(fā)展為肢體無力、癱瘓,共濟(jì)失調(diào),甚至瀕死狀態(tài);p.i.16天大部分動物癥狀開始緩解,評分為2.08±0.66(n=6);p.i.20天疾病癥狀完全消失.癥狀評分

3、隨p.i.時間的延長顯示動態(tài)變化趨勢,組織病理檢查顯示典型的改變且同上述病情變化相一致.2、EAE組QA值p.i.6天出現(xiàn)升高,但與佐劑組無顯著性差異;p.i.8-20天均較佐劑組顯著升高,且QA值升高早于臨床癥狀的發(fā)生.EAE組隨p.i.時間QA值呈現(xiàn)逐漸增高后緩慢下降的變化.p.i.1 0、12、14天較p.i.6、8、18、20天的比值明顯增高,高峰顯示在p.i.12天(8.82±2.41),但與p.i.14天(8.14±2.34

4、)間并無比值的差異性(q=0.68;p=0.46);p.i.8天及p.i.18、20天間QA值無顯著性差異.3、ICAM-1半定量免疫組化分析顯示EAE組p.i.8-18天的ICAM-1表達(dá)較對照組明顯增多;而p.i.4、6、20天的表達(dá)與對照組相似,且p.i.8天ICAM-1的表達(dá)早于臨床癥狀的發(fā)生.p.i.10、12、14、16天均較p.i.8、18天的表達(dá)顯著增多;表達(dá)高峰位于p.i.12天,但p.i.10、12、14天表達(dá)無明顯

5、差異性;p.i.16天較p.i.12天的表達(dá)顯著下降,但與p.i.10、14天的表達(dá)無差異顯著性.4、總結(jié)p.i.10-16天(n=24)EAE大鼠病情評分與QA值及ICAM-1半定量檢測結(jié)果顯示EAE癥狀隨QA值的升高及ICAM-1表達(dá)的增多逐漸加重(相關(guān)系數(shù)分別為r=0.81,p=0.001;r=0.57,p=0.003);QA值顯示隨ICAM-1表達(dá)上調(diào)逐漸升高(r=0.79,p=0.001)結(jié)論:1、EAE時BBB的破壞和ICA