柳珊瑚來源的一株真菌中生物堿化合物及其生物活性.pdf

1、海洋無脊椎動物珊瑚和海綿以及微生物是海洋天然產(chǎn)物三大主要來源。特別是近年來的研究熱點之一珊瑚，由于缺乏有效的物理防御手段，激烈的生存競爭使其能夠產(chǎn)生具有防御作用的化學物質(zhì)，這些化學防御物質(zhì)也可能是珊瑚的藥理活性次級代謝產(chǎn)物。但是研究卻發(fā)現(xiàn)，許多以前被認為是無脊椎動物如珊瑚本身產(chǎn)生的活性物質(zhì)，真正生產(chǎn)者是與其共附生的微生物。文獻調(diào)研發(fā)現(xiàn)，已報道的珊瑚來源的真菌次級代謝產(chǎn)物共有一百多個，包括新化合物和首次來源于珊瑚共附生真菌的化合物，主要類

2、型有萜類，生物堿類，醌類，大環(huán)內(nèi)酯類，苯衍生物等，這些化合物表現(xiàn)出抗菌、細胞毒、防附著等活性。本論文對一株來自于中國南海柳珊瑚的共附生真菌次級代謝產(chǎn)物，主要是生物堿類化合物，及其生物活性進行研究。
　　對2010年采自廣西潿洲島的柳珊瑚Carijoa sp.(GX-WZ-2010001)分離出的真菌進行抑菌活性初篩，其中一株真菌Scopulariopsis sp.的乙酸乙酯粗浸膏具有明顯的抗菌活性。文獻關(guān)于Scopulariops

3、is sp.次級代謝產(chǎn)物報道很少，柳珊瑚來源的Scopulariopsis sp.次級代謝產(chǎn)物尚未見報道，所以選擇該菌進行大規(guī)模發(fā)酵和次級代謝產(chǎn)物研究。利用正、反相硅膠柱層析、凝膠柱層析、半制備高效液相色譜(prep-HPLC)等分離手段分離得到化合物16個，根據(jù)1D和2D核磁共振、質(zhì)譜、紅外光譜、紫外光譜、圓二色譜(CD)、X-單晶衍射等波譜學和光譜學方法鑒定結(jié)構(gòu)11個(1–11)，分別為fumiquinazoline L(1), s

4、copuquinolones A–D(2–4,7), aflaquinolones A(5), D(6), F(8), G(9), cyclopenin(10), sterigmatocystin(11)，其中1–4和7為新化合物。這些化合物均首次從該屬真菌中分離得到。
　　化合物1為少見的七環(huán)喹唑啉類生物堿，命名為fumiquinazoline L。其結(jié)構(gòu)通過1D/2D NMR和NOE譜確定，絕對構(gòu)型通過X-單晶衍射確定，并且對

5、其在酸性條件下纈氨酸側(cè)鏈的消旋進行了研究。通過文獻調(diào)研，對兩個同類物fumiquinazolines(FQs) C和H的C-3, C-14, C-17手性碳的絕對構(gòu)型進行探討，糾正了FQ H的絕對構(gòu)型。對喹唑啉類生物堿化合物1以鄰氨基苯甲酸、L-色氨酸、L-丙氨酸為原料的生源合成途徑進行了推測。化合物2–9為一系列二氫喹啉酮類生物堿，結(jié)構(gòu)通過核磁數(shù)據(jù)和CD譜確定，化合物2,5,7的結(jié)構(gòu)通過X-單晶衍射確認。對喹啉酮類化合物2–10從鄰氨

6、基苯甲酸、蛋氨酸、苯丙氨酸為原料的生源合成途徑進行了推測。
　　化合物1、4和5對肺癌細胞A549具有弱的生長抑制活性，IC50分別為18.4、29.6和30.0μM?；衔?和7具有顯著的抗菌活性，其中化合物4對Vibrio parahemolyticus和Vibrio anguillarum的MIC值均為1.56μM，與陽性對照環(huán)丙沙星活性相當或更強，具有選擇性的強抗菌活性?；衔?對Staphylococcus aureus

7、,Bacillus cereus,Vibrio parahemolyticus,Vibrio parahemolyticus,Pseudomonas putida的MIC值分別為0.78,1.56,6.25,0.78和1.56μM,具有強抑菌活性?；衔?,6,7,8和11的鹵蟲致死活性都很強，LC50分別為2.22,1.16,0.79,7.85和0.56μM。對化合物7–9的抑菌活性進行構(gòu)效關(guān)系分析，表明C-3的甲氧基對抑菌活性貢獻明