我國(guó)蜜蜂微孢子蟲(chóng)種質(zhì)分布及侵染意蜂中腸的蛋白質(zhì)組分析.pdf

1、蜜蜂作為昆蟲(chóng)模式生物，是自然界中的一種重要的授粉昆蟲(chóng)。微孢子蟲(chóng)病是由微孢子蟲(chóng)所引起的危害成年蜜蜂健康的一種重要疾病。它不僅影響了蜜蜂的消化系統(tǒng)，降低了蜜蜂的抵抗力，而且導(dǎo)致蜂王繁殖能力下降，使群勢(shì)大幅下降。目前已知危害蜜蜂的微孢子蟲(chóng)有兩種:一種是蜜蜂微孢子蟲(chóng)(Nosema apis);另一種是東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)(Nosema cerana)。據(jù)目前國(guó)際上的報(bào)道發(fā)現(xiàn)，東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)（Nosema cerana）已成為西方蜜蜂群中微孢子蟲(chóng)病

2、的主要病原，對(duì)西方蜜蜂造成了更大的損失。鑒于我國(guó)這方面的系統(tǒng)研究尚少，有必要對(duì)我國(guó)主要意大利蜜蜂養(yǎng)蜂地區(qū)微孢子蟲(chóng)的種群分布進(jìn)行進(jìn)一步調(diào)查。此外，雖然關(guān)于微孢子蟲(chóng)病的相關(guān)報(bào)道越來(lái)越多，但蜜蜂的微孢子蟲(chóng)病致病機(jī)理及蜜蜂的免疫應(yīng)激反應(yīng)尚不是很清楚。為了明確蜜蜂的病原微孢子蟲(chóng)種群分布以及微孢子蟲(chóng)的致病機(jī)理，本研究通過(guò)采用多重PCR的方法對(duì)蜜蜂微孢子蟲(chóng)在全國(guó)主要養(yǎng)蜂地區(qū)的種群分布情況進(jìn)行了調(diào)查;并采用iTRAQ技術(shù)，對(duì)東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)（Nosem

3、acerana）侵染前后意蜂(Apis mellifera)中腸組織進(jìn)行了差異蛋白質(zhì)組分析;結(jié)合受侵染蜜蜂蛋白質(zhì)組分析結(jié)果對(duì)東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)侵染意蜂的致病機(jī)理及蜜蜂的免疫反應(yīng)進(jìn)行了初步的探究。
　　本實(shí)驗(yàn)所得到的主要結(jié)果如下:
　　1.對(duì)采集自全國(guó)16個(gè)養(yǎng)蜂地區(qū)的69份樣品進(jìn)行了微孢子蟲(chóng)種質(zhì)鑒定。鑒定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，所有69份樣品均發(fā)現(xiàn)了東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)(Nosema cerana)，而僅在山東壽光的一份樣品中同時(shí)檢測(cè)到了東方蜜蜂

4、微孢子蟲(chóng)(Nosema cerana)和蜜蜂微孢子蟲(chóng)（Nosema apis）。初步明確了東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)在中國(guó)西方蜜蜂群中已成為主要的病原種，同時(shí)進(jìn)一步驗(yàn)證了前人所報(bào)道的同一個(gè)蜂場(chǎng)可以同時(shí)感染2個(gè)種微孢子蟲(chóng)的現(xiàn)象。
　　2.選取濃度為2×108個(gè)/mL的東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)（Nosema cerana）對(duì)意蜂(Apis mellifera)進(jìn)行人工侵染，采用iTRAQ技術(shù)對(duì)侵染后24h、48h、96h、144h的病蜂進(jìn)行蛋白質(zhì)組研究