酒精對(duì)兔心肌損害及藥物干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的1.觀察酒精對(duì)兔心肌光鏡下細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)變化的影響及維生素C、輔酶Q10干預(yù)治療的效果。 2.觀察酒精對(duì)兔血漿NO、NOS、MDA含量的影響及維生素C、輔酶Q10治療的效果。 3.觀察酒精對(duì)兔心肌細(xì)胞原癌基因C-myc、C-fos表達(dá)的影響及維生素C、輔酶Q10治療的效果。 4.觀察酒精對(duì)兔心臟超聲參數(shù)LVPWd、LVSd、LVDd、FS％、EF％、E、A及E/A比值的影響及維生素C、輔酶Q10治療的效果。

2、 5.探討酒精作用下兔血漿酶、心肌細(xì)胞原癌基因表達(dá)及心臟超聲參數(shù)之間的關(guān)系及其意義。 6.探討酒精作用下維生素C、輔酶Q10對(duì)兔心肌的保護(hù)作用，及其作用機(jī)制。 方法1.分組：將30只白色獺兔隨即分為3組，Ⅰ組(正常對(duì)照組)：正常飼喂30天做超聲心動(dòng)圖、血樣檢查、處死做病理；Ⅱ組(飼喂酒精組)：飼喂酒精30天做超聲心動(dòng)圖、抽血檢查、處死做病理；Ⅲ組(干預(yù)治療組)：飼喂酒精30天停喂酒精加喂維生素C、輔酶Q1015天，做

3、超聲心動(dòng)圖、抽血檢查、處死做病理。 2.測(cè)超聲參數(shù)：將家兔靜脈注射戊巴比妥鈉25～30mg/kg麻醉，仰臥位固定四肢于木版上，木版向左傾斜30°，剃凈胸毛，使用頻率為3.0MHZ探頭，實(shí)驗(yàn)中儀器增益固定為50dB，圖像深度調(diào)至2.5cm，探頭置于胸骨左側(cè)，顯示胸骨旁左室長(zhǎng)軸切面圖象并進(jìn)行測(cè)量，所有超聲測(cè)值均取3個(gè)心動(dòng)周期的平均值，依據(jù)美國超聲心動(dòng)圖學(xué)會(huì)制定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行測(cè)量。 3.光鏡觀察：分別取各組兔心室后壁及室間隔心肌，

4、HE染色，光鏡下觀察兔心肌細(xì)胞形態(tài)的變化。 4.觀察心肌細(xì)胞原癌基因的表達(dá)：每組取10只兔，處死后立即剪開胸腔取出心臟。組織經(jīng)10％的甲醛固定72小時(shí)后行脫水，透明，石蠟包埋，作連續(xù)橫切和縱切，4μm/片。每一切面取5張切片，取中間一張作HE染色。光鏡下根據(jù)細(xì)胞的大小，染色的濃淡，核面積和胞漿面積等確定該層為室壁組織后，取相應(yīng)切面的切片作免疫組化檢測(cè)。 5.用分光光度計(jì)分析法測(cè)定血漿中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NO

5、S)、丙二醛(MDA)的含量。 結(jié)論1.酒精可以導(dǎo)致兔心肌炎癥反應(yīng)、心肌出血、心肌細(xì)胞凋亡、心肌纖維化等病理形態(tài)學(xué)變化； 2.酒精可以降低兔血漿中NO、NOS的含量； 3.酒精可以提高兔血漿中MDA的含量； 4.酒精可以引起兔心肌細(xì)胞原癌基因C-myc、C-fos的表達(dá)增強(qiáng)； 5.酒精可以降低兔心臟的收縮功能及舒張功能； 6.酒精作用下兔血漿酶含量、原癌基因的表達(dá)及心臟功能超聲參數(shù)有較強(qiáng)相關(guān)

6、關(guān)系，酒精可以降低NO、NOS活性，加劇過氧化反應(yīng)，誘導(dǎo)心肌細(xì)胞原癌基因C-myc、C-fos的表達(dá)，誘導(dǎo)心肌細(xì)胞的變性、凋亡和心肌纖維化，后兩者是酒精性心肌病心臟構(gòu)型改變的分子生物學(xué)基礎(chǔ)。原癌基因C-myc、C-fos可能是酒精性心肌病的始動(dòng)因子； 7.維生素C、輔酶Q10對(duì)酒精性心肌病具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與降低家兔血漿中NO、NOS活性，抑制氧自由基損傷，減輕過氧化反應(yīng)，抑制早期反應(yīng)基因的表達(dá)，從而減輕酒精性心肌病心肌細(xì)