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1、目的: 通過(guò)化學(xué)去細(xì)胞異種神經(jīng)基膜管復(fù)合堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步探索bFGF和NGF聯(lián)合應(yīng)用于異種去細(xì)胞神經(jīng)基膜管移植修復(fù)周?chē)窠?jīng)缺損的效果。 方法: 用化學(xué)方法處理兔脛神經(jīng)制成去細(xì)胞神經(jīng)基膜管,用流式細(xì)胞法檢測(cè)處理前后神經(jīng)的MHC-Ⅱ類(lèi)組織相容性抗原,并對(duì)去細(xì)胞處理后的神經(jīng)進(jìn)行HE染色及電鏡觀察;用雄性Wistar大鼠75只,建立右后肢坐骨神經(jīng)
2、10mm缺損模型,隨機(jī)分為5組,實(shí)驗(yàn)組Ⅰ為bFGF+NGF組(A組)、實(shí)驗(yàn)組Ⅱ?yàn)閎FGF組(B組)、實(shí)驗(yàn)組Ⅲ為NGF組(C組)、對(duì)照組Ⅰ為生理鹽水組(D組)、對(duì)照組Ⅱ?yàn)樽泽w神經(jīng)移植組(E組)。將處理好的神經(jīng)移植于大鼠的坐骨神經(jīng),并按分組肌注bFGF和NGF及生理鹽水2周。術(shù)后6周行神經(jīng)電生理檢測(cè),包括脛后肌群運(yùn)動(dòng)誘發(fā)電位,再生神經(jīng)的傳導(dǎo)速度;用HE染色,免疫組化染色,透射電鏡等方法對(duì)移植段遠(yuǎn)端吻合口再生神經(jīng)纖維進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,并對(duì)再生有
3、髓神經(jīng)纖維的數(shù)量、直徑和雪旺氏細(xì)胞進(jìn)行量化分析。 結(jié)果: 移植前新鮮神經(jīng)組MHC-Ⅱ檢測(cè)值為38.65±16.73,去細(xì)胞組MHC-Ⅱ檢測(cè)值為1.97±1.52,兩組比較存在顯著性差異(P<0.05),透射電鏡觀察顯示為膠原性管道,無(wú)細(xì)胞成份;術(shù)后6周,5組動(dòng)物行走均有不同程度的恢復(fù),結(jié)果表明,bFGF組、NGF組的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度和神經(jīng)纖維直徑及再生軸突計(jì)數(shù)優(yōu)于生理鹽水組,bFGF+NGF組、自體神經(jīng)移植組的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳
4、導(dǎo)速度和神經(jīng)纖維直徑及再生軸突計(jì)數(shù)高于其余各組,差異有顯著性(P<0.05)。bFGF+NGF組與自體神經(jīng)移植組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。組織學(xué)觀察見(jiàn)5組移植體遠(yuǎn)端吻合口橫切面再生神經(jīng)纖維呈微束狀,透射電鏡觀察再生神經(jīng)纖維具有正常的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。 結(jié)論: 經(jīng)化學(xué)萃取的去細(xì)胞兔脛神經(jīng)基膜管移植于大鼠,能夠成功修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損,而且移植后注射bFGF+NGF。的去細(xì)胞基膜管在神經(jīng)修復(fù)質(zhì)量上優(yōu)于單純的去細(xì)胞神經(jīng)基膜管
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