巨噬細(xì)胞釋放超氧陰離子和一氧化氮的調(diào)控機(jī)理.pdf

1、本文以fMLP短肽刺激巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)產(chǎn)生超氧陰離子，以脂多糖/γ-干擾素誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一氧化氮為模型，研究了巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)的動力學(xué)過程及其機(jī)制，以及褪黑素、阿魏酸和川芎嗪對巨噬細(xì)胞產(chǎn)生、釋放超氧陰離子和一氧化氮自由基的調(diào)控機(jī)理。利用化學(xué)發(fā)光法監(jiān)測了巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)的動態(tài)過程，結(jié)果表明巨噬細(xì)胞的呼吸爆發(fā)過程中超氧陰離子的化學(xué)發(fā)光峰與一氧化氮的產(chǎn)生有關(guān)。超微弱化學(xué)發(fā)光和電子順磁共振研究表明，褪黑素能有效的清除由fMLP刺激巨噬細(xì)胞呼

2、吸爆發(fā)產(chǎn)生的超氧陰離子自由基，同時也能抑制超氧陰離子自由基的產(chǎn)生。阿魏酸與褪黑素的效果相似，也能有效的清除由fMLP刺激巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)的超氧陰離子自由基和抑制超氧陰離子自由基的產(chǎn)生，而川芎嗪在高濃度時雖對超氧陰離子自由基的抑制或清除有一定的效果，但相比于阿魏酸而言卻并不顯著。采用反轉(zhuǎn)錄基因擴(kuò)增技術(shù)（RT-PCR）和蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)分析了巨噬細(xì)胞一氧化氮合酶（iNOS）的基因的轉(zhuǎn)錄，實驗結(jié)果表明褪黑素能抑制iNOS基因的轉(zhuǎn)錄，從而抑制

3、iNOS蛋白的表達(dá)，導(dǎo)致一氧化氮自由基的產(chǎn)生的減少。其可能原因是褪黑素能夠調(diào)節(jié)核轉(zhuǎn)錄因子NF-kB來影響iNOS蛋白表達(dá)；同樣，川芎嗪能抑制巨噬細(xì)胞iNOS的基因的轉(zhuǎn)錄，從而抑制iNOS蛋白的表達(dá)，具有有效清除一氧化氮或抑制一氧化氮自由基的產(chǎn)生的能力，達(dá)到調(diào)控釋放一氧化氮的目的，但是阿魏酸的這一作用卻并不顯著。實驗結(jié)果提示褪黑素、阿魏酸和川芎嗪對機(jī)體的抗氧化和保護(hù)作用，是由于它們能清除超氧陰離子自由基，或調(diào)控抑制一氧化氮自由基的大量產(chǎn)