紅花紅色苷的研究.pdf

1、紅花，又名紅藍(lán)花，別名有草紅花、刺紅花、紅花纓子、紅花草、紅花菜,系菊科（Compositae）植物紅花（Carthamus tinctorius L.）的干燥花，為我國(guó)常用中藥。紅花紅色苷是紅花的主要有效成分之一。 本論文對(duì)紅花總紅色苷的提取分離工藝，主要成分紅色苷制備新方法、結(jié)構(gòu)確證，標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)，含量測(cè)定方法、代謝動(dòng)力學(xué)及抗氧化作用進(jìn)行了研究，論文的主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下： (1) 紅花總紅色苷提取工藝優(yōu)化。采用正交

2、設(shè)計(jì)對(duì)堿液提取方法進(jìn)行工藝優(yōu)化，結(jié)果表明：紅花總紅色苷的最佳堿水提取條件為用10倍量水浸泡9次，在pH=10提取20min，再用pH=4酸化得到沉淀。該工藝與有機(jī)溶劑提取方法比較具有效率高和成本低的特點(diǎn)。 (2) 紅花紅色苷制備新方法、結(jié)構(gòu)確證和標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)過(guò)反復(fù)研究，篩選出了微晶纖維素柱層析和LH-20柱層析聯(lián)用進(jìn)行紅花紅色苷分離純化的新方法，與已有文獻(xiàn)報(bào)道方法比較，該方法簡(jiǎn)單、穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，迄今為止尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道。采用上述

3、方法分離純化獲一主要紅色素成分，HPLC法標(biāo)定純度不低于98.1％，通過(guò)對(duì)該化合物的理化性質(zhì)分析和波譜(UV、IR、MS 、1H-NMR、13C-NMR、DEPT)解析，確定該化合物為紅花紅色苷（carthamin），在此基礎(chǔ)上完成了紅花紅色苷對(duì)照品制備與標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)的研究。 (3) 含量測(cè)定方法研究。采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（Phenomenex Luna C18柱，4.6mm×150mm，5μm），柱溫25℃，乙腈-甲

4、醇-水（35:15:50）為流動(dòng)相（水調(diào)節(jié)pH值為3）；流速1mL·min-1，518nm檢測(cè)；并進(jìn)行相應(yīng)的方法學(xué)考察。紅花紅色苷在0.144～1.44μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，其回歸方程為：y=4.184531×106x-4858，r=0.9996,通過(guò)測(cè)定不同產(chǎn)地的6個(gè)樣品，初步確定紅花紅色苷在相應(yīng)藥材中的含量不得少于0.042％。該方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便，可以應(yīng)用于紅花藥材的含量測(cè)定。 (4) 對(duì)紅花紅色苷代謝動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究。通過(guò)反

5、復(fù)研究，篩選出了采用高效液相色譜來(lái)測(cè)定紅花紅色苷在小鼠體內(nèi)血藥濃度及其臟器中的分布的新方法。結(jié)果顯示，高效液相色譜法測(cè)定生物樣品中紅花紅色苷的含量方法穩(wěn)定，重現(xiàn)性良好；初步發(fā)現(xiàn)紅花紅色苷口服后吸收很快，在小鼠體內(nèi)呈二室模型分布，在小鼠肝、肺、腎、腦等臟器中有少量分布。上述結(jié)果為進(jìn)行紅色苷藥代謝動(dòng)力學(xué)研究提供了方法學(xué)依據(jù)。 (5) 紅花紅色苷抗氧化作用的研究。以鄰二氮菲-Fe2+氧化法檢測(cè)紅花紅色苷提取物清除H2O2/Fe2+體系

6、產(chǎn)生的羥自由基；硫代巴比妥酸比色法觀察小鼠肝勻漿的脂質(zhì)氧化；比色法觀察H2O2/Fe2+體系產(chǎn)生的羥自由基致紅細(xì)胞膜的破裂。結(jié)果：0.87～1.24mg/ml紅花紅色苷的羥自由基清除率為27.2％～100％，呈明顯量效關(guān)系；0.68～1.42mg/ml紅花紅色苷緩解小鼠肝勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化的抑制率為12.4％～84.6％，呈明顯的量效關(guān)系；0.48～1.24mg/ml紅花紅色苷抑制羥自由基引發(fā)的紅細(xì)胞破裂呈明顯的量效關(guān)系。表明紅花紅色苷具有