組織工程脫細(xì)胞人羊膜生物相容性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的 探討脫細(xì)胞羊膜基質(zhì)的生物相容性和細(xì)胞相容性。論證其作為新的骨組織工程3D基質(zhì)候選物的可行性。 方法 將成骨細(xì)胞MC3T3-E1種植在脫細(xì)胞羊膜上，用α-MEM常規(guī)培養(yǎng)。在倒置相差顯微鏡和掃描電鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)、存活時(shí)間以及細(xì)胞分布、排列情況。使用免疫熒光和共聚焦激光掃描顯微鏡觀察FAK、Paxillin、Integrin表達(dá)和分布情況。 結(jié)果 種植后12小時(shí)MC3T3-E1細(xì)胞在羊膜基質(zhì)上粘附，3天長(zhǎng)滿基質(zhì)。

2、7天后，細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)。細(xì)胞聚集成團(tuán)簇樣復(fù)層生長(zhǎng)，簇間以細(xì)胞條索相互交通。且在同一時(shí)期細(xì)胞形態(tài)多樣化，包括雙極、多極和球形。21天時(shí)細(xì)胞開始調(diào)亡。在細(xì)胞存活時(shí)期內(nèi)，細(xì)胞表達(dá)FAK(紅熒光)、Paxillin(綠熒光)、Integrin(綠熒光)蛋白。主要存在細(xì)胞膜上。免疫熒光雙標(biāo)FAK、Paxillin和FAK、Integrin，在細(xì)胞膜上出現(xiàn)強(qiáng)共聚焦表現(xiàn)為黃色熒光。 結(jié)論 1.MC3T3-E1細(xì)胞在羊膜基質(zhì)上以常規(guī)培養(yǎng)方