黃芪多糖對(duì)輻射致乳鼠心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制探討.pdf

1、目的:探討黃芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)對(duì)輻射所致心肌細(xì)胞損傷的可能保護(hù)作用及其機(jī)制。
　　方法:原代提取Wistar乳鼠心肌細(xì)胞,密閉培養(yǎng)于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中,取對(duì)數(shù)生長期的心肌細(xì)胞,用 X線照射心肌細(xì)胞建立輻射損傷模型,用不同濃度的 APS進(jìn)行干預(yù)。實(shí)驗(yàn)分五組:正常對(duì)照組;輻射損傷模型組(照射劑量為6Gy);黃芪多糖低劑量干預(yù)組(終濃度為0.025mg/mL);黃芪多糖中劑量干預(yù)

2、組(終濃度為0.05mg/ mL);黃芪多糖高劑量干預(yù)組(終濃度為0.1mg/mL)。MTT法檢測(cè)各組心肌細(xì)胞生長抑制率;流式細(xì)胞儀(Flow Cytometry,FCM)檢測(cè)各組心肌細(xì)胞的細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡;激光共聚焦(laser confocal microscope,LSCM)檢測(cè)各組心肌細(xì)胞線粒體功能;DCFH-DA熒光探針檢測(cè)各組心肌細(xì)胞 ROS表達(dá)水平;蛋白印跡法檢測(cè)各組心肌細(xì)胞內(nèi) CytC、Caspase-3、Caspas

3、e-9蛋白的相對(duì)表達(dá)。
　　結(jié)果:正常心肌細(xì)胞呈圓形、梭形及多邊形等多種形態(tài),細(xì)胞之間通過偽足相互交織成網(wǎng),呈簇狀生長。輻射損傷后心肌細(xì)胞部分變圓、漂浮、開始出現(xiàn)凋亡。與正常對(duì)照組相比,輻射損傷組心肌細(xì)胞生長抑制率明顯升高、細(xì)胞周期延長、凋亡增加、線粒體功能異常、線粒體膜電位(Mitochondrial membrane potential,ΔΨm)降低、ROS表達(dá)及 CytC,Caspase-3,Caspase-9蛋白的相對(duì)表達(dá)

4、量明顯升高,差異具有顯著性(p<0.05)。與輻射損傷組相比,黃芪多糖(APS)各干預(yù)組心肌細(xì)胞生長抑制率均不同程度下降、細(xì)胞周期均不同程度縮短、凋亡減少、線粒體功能有所改善,線粒體膜電位(ΔΨm)有所升高、ROS表達(dá)及 CytC,Caspase-3,Caspase-9蛋白的相對(duì)表達(dá)量均不同程度降低(p<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.黃芪多糖(APS)可以通過清除 ROS、縮短細(xì)胞周期、促進(jìn)心肌細(xì)胞增殖、穩(wěn)定線粒體膜電位