三種中醫(yī)治法對腦缺血再灌注大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞影響的研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)研究以缺血性中風(fēng)臨床常見證型為依據(jù)，選擇相應(yīng)的三種中醫(yī)治法及其代表方劑，對局灶性腦缺血再灌注模型大鼠進(jìn)行治療，以星形膠質(zhì)細(xì)胞為研究切入點(diǎn)，通過動(dòng)態(tài)檢測GFAP，觀察腦星形膠質(zhì)細(xì)胞的變化，并對與其相關(guān)的三種細(xì)胞因子GDNF、bFGF和TGF-β1蛋白表達(dá)的觀察，比較三種治法及其代表方劑在不同時(shí)間位點(diǎn)的作用特點(diǎn)，探討三種治法對缺血性腦損傷的最佳作用時(shí)間位點(diǎn)與作用機(jī)制，為中醫(yī)藥正確辨證論治缺血性中風(fēng)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：健

2、康Wistar大鼠140只，雌雄各半，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、益氣活血組、潛陽熄風(fēng)組和化痰通腑組，每組28只，四個(gè)時(shí)間點(diǎn)各7只。采用線栓大腦中動(dòng)脈法制作大鼠局灶性腦缺血再灌注模型，分別觀察益氣活血、潛陽熄風(fēng)、化痰通腑三種中醫(yī)治法及其代表方劑在缺血2h再灌注6h、24h、48h和72h的治療效果。取材采用心臟內(nèi)灌流固定法，GFAP、GDNF、bFGF和TGF-β1蛋白表達(dá)采用免疫組織化學(xué)染色SABC法，HE染色觀察病理形態(tài)學(xué)變化。數(shù)據(jù)統(tǒng)

3、計(jì)方法：采用南京捷達(dá)DP 801圖像分析系統(tǒng)和SPSS 11.0 for Windows軟件處理，兩組之間比較用t檢驗(yàn)，多組之間比較用方差分析。 結(jié)果：1. GFAP表達(dá)情況：缺血再灌注各時(shí)間點(diǎn)，假手術(shù)組有GFAP表達(dá)，模型組GFAP表達(dá)較假手術(shù)組明顯增加；在缺血再灌注6h，潛陽熄風(fēng)組較模型組GFAP表達(dá)明顯增加；再灌注24h，各治療組較模型組GFAP表達(dá)均無明顯變化；再灌注48h，益氣活血組較模型組和化痰通腑組有顯著抑制GFA

4、P表達(dá)的作用；再灌注72h，益氣活血組較模型組和潛陽熄風(fēng)組有明顯的抑制GFAP表達(dá)的作用。2. 在缺血再灌注各時(shí)間點(diǎn)，三種蛋白（GDNF、TGF-β1、bFGF）表達(dá)：假手術(shù)組少量表達(dá)；模型組較假手術(shù)組明顯升高；各治療組較模型組均有顯著升高。（1）GDNF蛋白表達(dá)情況：模型組GDNF蛋白表達(dá)于再灌注24h出現(xiàn)一高峰，48h已下降，72h回升。再灌注6h、48h，組間比較無顯著性差異；再灌注24h，化痰通腑組較益氣活血組和潛陽熄風(fēng)組顯著升

5、高；再灌注72h，益氣活血組較化痰通腑組與潛陽熄風(fēng)組顯著升高。（2）TGF-β1蛋白表達(dá)情況：隨再灌注時(shí)間的延長，模型組TGF-β1蛋白表達(dá)逐漸升高，于72h最高。再灌注24h、48h，組間比較無顯著差異；再灌注6h，潛陽熄風(fēng)組TGF-β1蛋白表達(dá)較益氣活血組和化痰通腑組顯著升高；再灌注72h，益氣活血組較潛陽熄風(fēng)組和化痰通腑組顯著升高。（3）bFGF蛋白表達(dá)情況：隨再灌注時(shí)間的延長，模型組bFGF蛋白表達(dá)逐漸升高，于48h最高，72h

6、已降低。組間比較，再灌注6h，化痰通腑組TGF-β1蛋白表達(dá)較益氣活血組和潛陽熄風(fēng)組顯著升高；其余各時(shí)間點(diǎn)組間比較無顯著性差異。 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)表明，在腦缺血性損傷后再灌注不同時(shí)間點(diǎn)，不同治法作用下，星形膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)不同，其標(biāo)記性蛋白GFAP及與星形膠質(zhì)細(xì)胞相關(guān)的三種細(xì)胞因子GDNF、bFGF和TGF-β1也發(fā)生規(guī)律性的變化。提示：（1）腦缺血損傷是一個(gè)動(dòng)態(tài)的多環(huán)節(jié)的病理過程，中醫(yī)藥具有多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)的治療作用；（2）各種中醫(yī)治