造血干細(xì)胞移植患者白消安藥動(dòng)學(xué)研究及有限采樣法在白消安治療藥物監(jiān)測中的應(yīng)用.pdf

1、目的
　　1.采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS/MS)測定血漿白消安濃度。
　　2.評價(jià)白消安（Bu）的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)藥-時(shí)曲線下面積（AUC）、最大血藥濃度（Cmax）、清除率（CL）等在造血干細(xì)胞移植（HSCT）患者體內(nèi)的變異性。
　　3.分析臨床療效等指標(biāo)與AUC的關(guān)系，初步得出HSCT患者Bu的AUC范圍。
　　4.建立HSCT患者靜脈滴注白消安的有限采樣（LSS）模型。
　　方法
　　1

2、.LC-MS/MS法測定白消安血藥濃度，色譜條件：Agilent ZORBA SB-C18色譜柱(5μm，150mm×4.6mm)、流動(dòng)相為10mmol·L-1乙酸銨緩沖液：甲醇（60:40 v/v）、流速為0.5mL·min-1、柱溫35℃、進(jìn)樣量10μL，內(nèi)標(biāo)：白消安-d8。質(zhì)譜條件：離子極性為正離子，離子化方式為電噴霧離子源（ESI），離子檢測方式為選擇性離子檢測(SIM)，檢測對象為白消安（[M+H]+，m/z151）和白消安-

3、d8（[M+H]+，m/z159），霧化室壓力45PSI，干燥氣流速為10L·min-1，毛細(xì)管電壓3.5kV，裂解電壓70V，碰撞能量5V。
　　2. HSCT患者于Bu預(yù)處理第1劑前0 h和第1劑后1、2、3、4、5h和6h采集血樣，用建立的LC-MS/MS法測定白消安血藥濃度，利用DAS2.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，擬合血藥濃度-時(shí)間曲線，確定隔室模型，計(jì)算Bu的AUC、t1/2α、V1、Cmax、CL等藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)及其變異性

4、。
　　3.應(yīng)用SPSS20.0軟件，考察年齡、性別、疾病類型等因素對Bu PK參數(shù)的影響；利用局部加權(quán)回歸散點(diǎn)平滑法（lowess smooth）討論臨床療效等指標(biāo)與AUC的關(guān)系，Logistic回歸法評價(jià)毒副作用發(fā)生率與AUC的關(guān)系，得出HSCT患者Bu的AUC范圍。
　　4.應(yīng)用SPSS20.0軟件以稀疏血藥濃度數(shù)據(jù)點(diǎn)建立多元回歸數(shù)學(xué)模型，對模型進(jìn)行Jackknife法和Bootstrap法內(nèi)部驗(yàn)證，同時(shí)利用組內(nèi)相關(guān)系

5、數(shù)（ICC）和Bland-Altman(BA)分析方法評估經(jīng)典法和LSS法的一致性。
　　結(jié)果
　　1.LC-MS/MS法測定白消安血藥濃度，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程y=1.902x+0.010，相關(guān)系數(shù) r=0.996；線性范圍：0.021-10.435μmol·L-1；白消安日內(nèi)RSD≤7.1％，日間RSD≤3.8%；方法回收率為98.0%-104.8%；提取回收率分別為（105.1±2.2）%，（106.8±2.4）%，（99.0

6、±2.0）%；血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不干擾白消安的測定。
　　2.第1劑靜脈給藥后Bu在HSCT預(yù)處理患者體內(nèi)過程符合二室模型。HSCT患者體內(nèi)Bu的AUC(0-t)和AUC(0-∞)分別在356.80-946.91μmol·L-1和457.04-1379.83μmol·L-1范圍內(nèi)波動(dòng)，t1/2α、V1、K10、K12、K21參數(shù)變異性大。
　　3.本研究發(fā)現(xiàn)男患者與女患者間Cmax有顯著性差異；“AML/ALL”、“CML”與

7、“MDS＂組間t1/2β有顯著性差異；“Ara-c、Flu、Bu、Cy”、“Ara-c、Bu、Cy”、“Flu、Bu”、“Ara-c、Flu、Cy、Bu”間t1/2α、K12、K21有顯著性差異。同時(shí)，利用lowess smooth法以移植后患者造血功能恢復(fù)時(shí)間為短期療效指標(biāo)，分析AUC與造血功能恢復(fù)時(shí)間關(guān)系，從穩(wěn)定性角度考慮得出最佳AUC范圍為550-850μmol·min·L-1；但Logistic回歸法評價(jià)毒副作用發(fā)生率與 AUC

8、沒有顯著關(guān)系，其中肝靜脈閉塞綜合征（Graft-versus host disease，GVHD)的發(fā)病率與年齡有關(guān)（P=0.034）。
　　4.兩點(diǎn)（C3、C1）預(yù)測的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)回歸模型的線性關(guān)系較好（調(diào)整的r2=0.931），平均預(yù)測誤差為0.25%，均方根誤差為4.83%，組內(nèi)相關(guān)系數(shù)的95%置信區(qū)間為0.932-0.984，BA分析一致性界限為﹣9.7-9.4。LSS法與經(jīng)典法評價(jià)結(jié)果一致。
　　結(jié)論