CYP3A5基因的遺傳多態(tài)性對(duì)肝移植受體術(shù)后免疫抑制劑FK506用藥個(gè)體間差異的作用研究.pdf

1、本研究通過對(duì)供受體的CYP3A5基因進(jìn)行多態(tài)性分析，旨在探討CYP3A5基因的遺傳多態(tài)性與肝移植術(shù)后免疫抑制劑FK506用藥的個(gè)體間差異是否存在相關(guān)性，并且評(píng)價(jià)供體CYP3A5基因與受體CYP3A5基因的遺傳多態(tài)性對(duì)這種差異所分別產(chǎn)生的影響。從而為指導(dǎo)肝移植術(shù)后免疫抑制劑個(gè)體化應(yīng)用尋求可靠的參考指標(biāo)。 研究方法：選擇2004年7月至2005年3月在我院接受肝移植手術(shù)并且術(shù)后采用FK506、驍悉(MMF)和激素三聯(lián)用藥為免疫抑制方

2、案的53例患者作為研究對(duì)象。在術(shù)后第1、2周及1月三個(gè)時(shí)間點(diǎn)記錄FK506的服藥劑量及測(cè)定全血藥物谷濃度。 取患者外周抗凝血分離單個(gè)核細(xì)胞并提取受體基因組DNA，PCR擴(kuò)增CYP3A5*3基因，采用限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)方法和DNA直接測(cè)序法分別檢測(cè)判定受體CYP3A5*3基因的單核苷酸多態(tài)性。根據(jù)不同的基因型將患者分成兩組：表達(dá)組(*1/*1和*1/*3)和非表達(dá)組(*3/*3)。比較受體CYP3A5*3基因的多態(tài)性

3、與FK506用藥劑量及血藥谷濃度/劑量比值(C/D)的相關(guān)性。 取供體脾臟或外周抗凝提取供體基因組DNA，相同的方法檢測(cè)供體CYP3A5*3基因的單核苷酸多態(tài)性。根據(jù)不同的基因型將患者分成兩組：表達(dá)組(*1/*1和*1/*3)和非表達(dá)組(*3/*3)。比較供體CYP3A5*3基因的多態(tài)性與FK506用藥劑量及血藥谷濃度/劑量比值(C/D)的相關(guān)性。 結(jié)合供、受體的基因型，根據(jù)排列組合重新分組，進(jìn)一步分析供、受體CYP3A

4、5*3基因的多態(tài)性對(duì)FK506個(gè)體間用藥差異分別產(chǎn)生的影響。 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件完成，組間比較采用非參數(shù)統(tǒng)計(jì)法分析。兩組之間的FK506濃度/劑量比值的比較采用Mann-WhitneyU法檢驗(yàn)，p＜0.05為差異有顯著性。 研究結(jié)果：53例患者平均年齡45±9歲(29～75歲)，平均體重60.4±10.3kg(40～85kg)。其中有6例患者CYP3A5基因型為野

5、生型純合子(*1/*1，11.3％)，20例為突變型純合子(*3/*3，37.8％)，27例為突變型雜合子(*1/*3，50.9％)。對(duì)應(yīng)供體的基因型出現(xiàn)頻率分別為：5(9.4％)，23(43.4％)，25(47.2％)。 為控制肝移植術(shù)后一月內(nèi)的FK506全血谷濃度在7-10ng/ml，53例患者在術(shù)后1月口服FK506的需藥量為每天0.022mg/kg至0.222mg/kg不等，平均為(0.097±0.051)mg/kg。口

6、服用藥量最大相差近10倍。 按照供體CYP3A5基因型分組，在術(shù)后第2周和1月*1/*1(*1/*3)組的C/D比值明顯低于*3/*3組(p＜0.05)，分別為(100.99±55.71vs.139.83±70.3，p=0.036；100.13±64.27vs.141.47±778.92，p=0.021)，而在第1周兩組之間差異沒有顯著性(106.32±46.75vs.139.16±70.01，p=0.146)；根據(jù)受體自身CY

7、P3A5基因型分組，*1/*1(*1/*3)組的C/D比值在術(shù)后第1周、2周和1月均低于*3/*3組，分別為(112.85±52.10vs.133.31±70.03；109.12±55.19vs.132.25±77.56；112.70±74.43vs.126.93±72.28)，但是差異沒有顯著性(p＞0.05)。 結(jié)合供、受體CYP3A5基因型進(jìn)一步分析，結(jié)果顯示：供受體同為表達(dá)型(19例)與同為非表達(dá)型(9例)相比，前者C/

8、D比值在術(shù)后第2周和1月仍顯著低于后者，p＜0.05，且兩者之間的差異更大，說明消除了因供受體基因型交叉的影響，CYP3A5基因型對(duì)FK506代謝個(gè)體差異的作用更加明顯。當(dāng)供體為非表達(dá)型時(shí)，表達(dá)型受體組(14例)的C/D比值低于非表達(dá)型受體組(9例)；當(dāng)供體為表達(dá)型時(shí)，表達(dá)型受體組的C/D比值與非表達(dá)型受體組幾乎相近；而無論當(dāng)受體為表達(dá)型或非表達(dá)型，表達(dá)型供體組的C/D比值均低于非表達(dá)型供體組。提示受體基因型對(duì)FK506的個(gè)體差異的影響