受體型酪氨酸磷酸酯酶PTPRO表達(dá)調(diào)控機(jī)制的研究.pdf

1、人PTPRO是受體型酪氨酸磷酸酯酶家族的一員，其功能主要涉及腎臟腎小球細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，神經(jīng)組織中軸突的生長(zhǎng)和導(dǎo)向，以及腫瘤抑制。與其功能相對(duì)應(yīng)，PTPRO主要表達(dá)于不同發(fā)育時(shí)期的腎臟組織和神經(jīng)組織，而在很多腫瘤細(xì)胞中則通過(guò)DNA甲基化沉默。例如，在腎臟中，PTPRO表達(dá)于發(fā)育早期的腎小球細(xì)胞頂部和發(fā)育成熟的腎小球足細(xì)胞頂部；在腦中，PTPRO最高表達(dá)出現(xiàn)于妊娠中后期，這一時(shí)期也是腦部軸突發(fā)生的主要時(shí)期；由高甲基化介導(dǎo)的PTPRO的沉默

2、常見(jiàn)于不同的腫瘤和腫瘤細(xì)胞系中。盡管存在表達(dá)差異，但是我們對(duì)PTPRO表達(dá)的調(diào)控機(jī)制了解很少。 我們?cè)敿?xì)地研究了PTPRO表達(dá)調(diào)控的機(jī)制。首先，我們發(fā)現(xiàn)PTPRO是一個(gè)新的E2F1的靶基因。過(guò)表達(dá)E2F1能上調(diào)PTPRO的mRNA水平并且激活PTPRO啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因活性；PTPRO啟動(dòng)子上存在兩個(gè)E2F1的結(jié)合位點(diǎn)；EMSA和ChIP實(shí)驗(yàn)表明E2F1能夠結(jié)合于PTPRO的啟動(dòng)子。其次，我們發(fā)現(xiàn)一個(gè)小的microRNA簇-

3、miR-17-92也能夠調(diào)控PTRPO的表達(dá)。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)PTPROmRNA的3'UTR區(qū)存在miR-17-92的結(jié)合位點(diǎn)；報(bào)告基因的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明這些位點(diǎn)對(duì)于PTPROmRNA的穩(wěn)定性是重要的，miR-17-92能下調(diào)PTPRO的mRNA和蛋白水平。最后，我們發(fā)現(xiàn)E2F1和miR-17-92在細(xì)胞周期進(jìn)程中協(xié)同調(diào)控PTPRO的表達(dá)。PTPRO的mRNA在細(xì)胞周期的S期上調(diào)，這與E2F1上調(diào)于G1/S期，以及miR-17-5p(mi