雞FSHβ基因SNPs分析及其與早期產(chǎn)蛋性能關(guān)系的研究.pdf

1、促卵泡激素(Follicle-stimulatinghormone，F(xiàn)SH)是由垂體前葉分泌的糖蛋白類促性腺激素，在下丘腦—垂體—性腺繁殖軸中起到重要的作用。是由α和β兩個(gè)亞基組成，其中α亞基為hCG、LH、TSH等糖蛋白激素所共有，特異性β亞基決定其特異結(jié)合位點(diǎn)，決定其生物學(xué)功能。α和β亞基單獨(dú)都不具有生物活性，二者結(jié)合在一起引起結(jié)構(gòu)上的變化，才具有生物活性。本研究以FSHβ基因作為候選基因，運(yùn)用PCR-SSCP法檢測(cè)基因變異，并分析

2、其變異與雞早期產(chǎn)蛋性能的相關(guān)性。 以中國(guó)優(yōu)良地方雞種文昌雞(n=150)作為試驗(yàn)材料，巴布考克蛋雞(n=100)作為對(duì)照驗(yàn)證材料。根據(jù)GenBank登陸的雞FSHβ基因序列(登陸號(hào)：AF467082)，設(shè)計(jì)11對(duì)引物進(jìn)行PCR-SSCP分析，以檢測(cè)雞FSHβ基因的單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotidepolymorphisms，SNP)位點(diǎn)。PCR擴(kuò)增區(qū)域包括FSHβ基因近端調(diào)控區(qū)和所有外顯子。PCR-SSCP結(jié)果顯示

3、，只有pro2和exon3c兩個(gè)位點(diǎn)具有多態(tài)性，其他位點(diǎn)都表現(xiàn)為同一基因型。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，該文昌雞群體處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。對(duì)多態(tài)的兩個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行克隆、測(cè)序，并與GenBank登陸的序列進(jìn)行同源性比較，結(jié)果顯示exon3c位點(diǎn)有3個(gè)SNP位點(diǎn)，T2414C，A2447G和A2540C，均在3'UTR區(qū)，沒有引起氨基酸的變化，且3個(gè)SNP表現(xiàn)為同一基因型，可能是連鎖突變；pro2位點(diǎn)存在6個(gè)SNP位點(diǎn)，即G-494A，T-

4、470A，A-464G，-450處插入堿基A，A-405G，A-361G。對(duì)文昌雞早期產(chǎn)蛋性能與各多態(tài)位點(diǎn)的基因型進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果顯示，外顯子3的堿基變異對(duì)開產(chǎn)日齡、開產(chǎn)蛋重、40周齡產(chǎn)蛋量和40周齡平均蛋重等早期產(chǎn)蛋性狀均無(wú)顯著影響(P＞0.05)；而5’調(diào)控區(qū)的變異對(duì)的早期產(chǎn)蛋性能有顯著影響(P＜0.05)，BB型開產(chǎn)日齡顯著(P＜0.05)早于AA和AB型；且BB型40周齡產(chǎn)蛋量也顯著(P＜0.05)高于AA和AB型，這說明等位

5、基因B是雞的早期產(chǎn)蛋性能的優(yōu)勢(shì)基因。等位基因A和B的基因頻率在巴布考克蛋雞群體中分別為0.29和0.71，且沒有檢測(cè)到AA型，在一定程度上進(jìn)一步驗(yàn)證本試驗(yàn)結(jié)果。 應(yīng)用TFSEARCHver1.3軟件對(duì)FSHβ基因5’調(diào)控區(qū)潛在的調(diào)控元件和蛋白結(jié)合因子預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)：T-470A，A-464G和A-361G幾個(gè)位點(diǎn)的堿基變異引起蛋白轉(zhuǎn)錄結(jié)合因子發(fā)生改變，其中A-361G變異使5’調(diào)控區(qū)增加一個(gè)GATA-1轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)與之結(jié)合；而A-