CO-,2-氣腹對結(jié)直腸腫瘤黏附侵襲能力影響的基礎(chǔ)與臨床研究.pdf

1、目的:研究不同壓強持續(xù)性CO<,2>氣腹對結(jié)腸癌細(xì)胞表面黏附分子表達(dá)的動態(tài)影響，對結(jié)腸癌細(xì)胞黏附侵襲能力以及在腹腔鏡結(jié)直腸癌手術(shù)中對患者遠(yuǎn)期療效的影響。 方法:建立體外氣腹模型，選用人結(jié)腸癌細(xì)胞株SWll16，分別在不同壓強99.5％醫(yī)用CO<,2>氣體(6，9，12和15 mmHg)以及常規(guī)培養(yǎng)條件下暴露1h。①使用流式細(xì)胞技術(shù)(FACScan)和實時熒光定量PCR檢測SWll16細(xì)胞表面黏附分子上皮鈣粘著蛋白(E-cadhe

2、fin)，細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)，CD44，CD44v6和E-選擇素(E-selectin)在處理后O，12，24，48和72 h的表達(dá)；取各組處理后Oh和72h細(xì)胞進(jìn)行體外黏附試驗。②另選人結(jié)腸癌細(xì)胞株L,OVO，Col0205，與SWlll6一同按上述方法分組處理，取各組處理后0h和72h細(xì)胞進(jìn)行體外侵襲試驗。③收取SWlll6經(jīng)體外氣腹模型及對照組處理的各組細(xì)胞，分別注入每組16只裸鼠腹腔。2周后，各組裸鼠取10只處死

3、，觀察腹腔內(nèi)腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)及各臟器轉(zhuǎn)移情況。各組剩余6只裸鼠觀察生存時間。④前瞻性非隨機的將2001年9月至2005年3月25l例中低位直腸癌病例分為腹腔鏡組(LTME)110例與開腹組(OTME)141例。將2001年4月至2005年6月122例右半結(jié)腸癌病例分為腹腔鏡組(LRH)57例與開腹組(ORH)65例。隨訪患者復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移時間以及生存時間，比較腹腔鏡組與開腹組病例的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移結(jié)果與長期生存結(jié)果。 結(jié)果:①黏附分子的表達(dá)：F

4、ACScan結(jié)果顯示，經(jīng)各組壓強CO<,2>氣腹處理后，SWll16表面各黏附分子的表達(dá)與處理前相比變化有顯著性(P<0.05)，這些變化在各壓強CO<,2>處理后72h之前均恢復(fù)至處理前水平，或低于處理前水平(P<0.05)。在處理后Oh，隨CO<,2>氣腹壓強增高，：E-cadherin、CD44和ICAM-1表達(dá)量降低(P<0.05)，結(jié)腸癌細(xì)胞的黏附能力也呈下降的趨勢(P<0.05)，處理后72 h，各壓強組之間的細(xì)胞黏附差異無

5、顯著性。實時熒光定量PCR檢測顯示相似結(jié)果。②體外侵襲試驗：SW1116細(xì)胞經(jīng)15mmHg CO<,2>處理后Oh，侵襲細(xì)胞顯著少于處理前(P<0.05)；氣腹處理后Oh，15mmHg壓強組的細(xì)胞侵襲顯著低于其他各壓強組(P<0.05)；而6mmHg壓強組則顯著高于其他各組(P<0.05)。IOVO，ColO205細(xì)胞均有相似的變化趨勢。在CO<,2>氣腹處理后72h，各組細(xì)胞侵襲與各自處理前細(xì)胞相比無顯著差異，各壓強組的結(jié)腸癌細(xì)胞穿膜

6、量亦無顯著差異(P>0.05)。③各組裸鼠致瘤率的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。裸鼠腹腔內(nèi)瘤結(jié)節(jié)數(shù)：6mmHg組(41.7±14.90)與15mmHg組(29.7±9.91)之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.04.6)。不同壓強組的各臟器轉(zhuǎn)移情況以及生存率的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。④腹腔鏡組與開腹組的右半結(jié)腸癌、中低位直腸癌手術(shù)均未出現(xiàn)切口／戳孔種植，在局部復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、總體生存率和無瘤生存率等方面亦無顯著差異。 結(jié)論:①CO<,2>氣腹能對腫瘤