菝葜提取物抗卵巢癌的多重效應(yīng)及其分子機(jī)制.pdf

1、目的：研究菝葜提取物抗卵巢癌細(xì)胞的作用，并從細(xì)胞水平和分子水平討探其發(fā)揮該作用的機(jī)制。
　　 方法：用菝葜提取物對(duì)卵巢癌細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)。首先，采用CCK-8，EdU 法以及克隆形成實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞的活性、增殖、克隆形成、以及提取物與傳統(tǒng)藥物聯(lián)用后的化療效應(yīng)進(jìn)行考察；接著，分別采用IP 單染法和Annexin V-FITC/PI 雙染法，經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)藥物處理后細(xì)胞的周期比例和細(xì)胞的凋亡特征；然后，通過(guò)Transwell 小室法考察藥物

2、處理后細(xì)胞的遷移能力；最后，對(duì)NF-κB 及多種蛋白的表達(dá)水平進(jìn)行了Western blot分析，并用免疫熒光染色法觀察NF-κB在細(xì)胞中的定位。
　　 結(jié)果：菝葜正丁醇提取物可有效抑制卵巢癌細(xì)胞的活性、增殖能力和克隆形成能力，抑制作用呈濃度依賴性，并且，該提取物對(duì)傳統(tǒng)化療藥物順鉑和阿霉素具有增敏作用。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，菝葜正丁醇提取物將A2780細(xì)胞周期阻滯在G2/M 期并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)顯示菝葜正丁醇提取物干預(yù)后

3、，細(xì)胞的遷移能力減弱。Westernblot分析發(fā)現(xiàn)，藥物可能通過(guò)抑制AKT的活性阻滯NF-κB的核轉(zhuǎn)錄，從而使NF-κB的活性受到抑制，進(jìn)而抑制其下游因子Bcl-2，Bcl-xL，XIAP，cIAP-1，ICAM-1，VEGF和Cyclin D1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示菝葜正丁醇提取物可活化Capase-3、PARP和Bax 因子。
　　 結(jié)論：上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，菝葜正丁醇提取物在體外可從多方面發(fā)揮抗卵巢癌的作用，抑制NF-κB的活性